一种不同氮磷条件下微量元素影响藻类生长的实验方法

摘要

一种不同氮磷条件下微量元素影响藻类生长的实验方法，首先配制新鲜培养基，培养基中无氮源、磷源及要测试的微量元素，之后在其中投入不同含量的N源、P源以及要测试的微量元素，得到不同的N/P比和不同的微量元素含量的培养基；然后选择实验藻种，接种到预先设定的含不同氮磷比及不同微量元素含量的新鲜培养基中；接着培养藻类，对藻类进行光度测量，计算出叶绿素a的含量，再对培养好的藻类进行藻细胞密度计数，最终根据叶绿素a和藻细胞密度的测量结果，对样品进行不同氮磷条件下微量元素影响藻类生长的状态进行分析，本发明能够在短时间内同时测出叶绿素a和藻细胞密度，迅速通过数据来反应实验结果，具有灵敏度高、精密度高、准确度高优点。

主权项

一种不同氮磷条件下微量元素影响藻类生长的实验方法，其特征在于，包括：第一步，配制新鲜培养基：培养基的pH值不得超过8.5且其中无氮源、磷源及要测试的微量元素，之后在其中投入不同含量的N源、P源以及要测试的微量元素，得到不同的N/P比和不同的微量元素含量的培养基；第二步，进行样品取样及预处理：选择实验藻种，取藻种液在3500r/min下离心10min，弃去上清液，沉淀的藻细胞用15mg/L的NaHCO₃溶液重新悬浮，重复离心、悬浮过程2次后作为接种藻种，把藻种接种到预先设定的含不同氮磷比及不同微量元素含量的新鲜培养基中；第三步，培养藻类：将接种过藻种的新鲜培养基倒入锥形瓶中置于培养箱内，培养箱数据调整为温度25℃、光照2000Lux、震荡70rpm，时间设置为12Hr昼/12Hr夜交替；第四步，对藻类进行光度测量，计算出叶绿素a的含量，对叶绿素a的测定采用甲醇萃取法，分别在不同的锥形瓶中取3mL样品液在3500r/min下离心10min，弃去上清液，之后等体积加入体积分数90％的甲醇，混合均匀，放置在4℃的黑暗条件下萃取6～8h后，在3500r/min下离心10min，取上清液测定样品在665nm处的吸光值；第五步，对培养好的藻类进行藻细胞密度计数；第六步，结果分析：根据叶绿素a和藻细胞密度的测量结果，对样品进行不同氮磷条件下微量元素影响藻类生长的状态进行分析。