降解甲醛的微生物酶制剂的制备工艺

摘要

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种降解甲醛的微生物酶制剂的制备工艺。本发明要解决的技术问题是，针对现有降解甲醛的微生物酶制剂生产技术存在的酶产量和酶活力的不足，提供一种采用甲基营养型微生物发酵培养并提取制备微生物酶制剂的工艺。本发明制备降解甲醛的微生物酶制剂的工艺包括如下步骤：对甲基营养型微生物菌株进行种子液培养；接种种子液进行补料流加发酵培养；收集发酵菌体，提取纯化胞内降解甲醛的酶，制成微生物酶制剂。

主权项

降解甲醛的微生物酶制剂的制备工艺，其特征是，包括以下步骤：（1）将甲基营养型微生物菌株接种于培养基A，进行种子液培养；（2）将培养一段时间的种子液，接种到发酵培养基B，使用补料液C进行流加培养；（3）发酵结束后，对发酵液进行离心，收集获得菌体；（4）使用磷酸氢二钠‑磷酸氢钠缓冲液洗涤菌体，获得菌悬液；（5）使用超声波破碎机破碎菌悬液，获得破碎菌悬液；（6）使用微滤膜过滤破碎菌悬液，去除残余菌体，获得胞内物质溶液；（7）将饱和硫酸铵溶液与上述胞内物质溶液混合，保持4℃条件沉淀3‑5小时后，以10000‑15000 r/min转速，离心5‑15 min，收集底层沉淀，获得沉淀物质，再次溶解沉淀物质获得粗提酶液；（8）使用超滤膜滤掉粗提酶液中的小于20KD的杂蛋白；（9）使用离子交换柱对上述粗提酶液进行吸附脱盐，获得去盐的粗提酶液；（10）对去盐的粗提酶液进行凝胶柱层析，分离得到精提酶液；（11）使用冷冻干燥机对精提酶液进行冷冻干燥，获得微生物酶制剂。