一种用于微骨折手术的软骨诱导基质的制备方法

摘要

本发明提供了一种用于微骨折手术的软骨诱导基质及其制备方法，软骨诱导基质包括凝胶和添加剂，凝胶为纤维蛋白，胶原蛋白，透明质酸，凝血酶；添加剂在培养基中的终浓度为：维生素C：233μM～287μM；亚油酸：3.7μM～8.9μM；胆固醇：9μM～17μM；地塞米松：6nM～15nM；乙酰半胱氨酸：43μM～58μM；转铁蛋白：18μg/mL～32μg/mL；亚硒酸钠：22nM～52nM；泛酸钠：13μM～24μM；生物素：28μM～43μM；胰岛素样生长因子：7μg/mL～18μg/mL；表皮生长因子：2ng/mL～9ng/mL；成纤维生长因子：2ng/mL～9ng/mL；血小板衍生生长因子：2ng/mL～9ng/mL；转化生长因子：30ng/ml～70ng/ml；胰岛素铁硒传递蛋白：1％。

主权项

一种用于微骨折手术的软骨诱导基质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：将维生素C，亚油酸，胆固醇，地塞米松，乙酰半胱氨酸，转铁蛋白，亚硒酸钠，泛酸钠，生物素，胰岛素样生长因子，表皮生长因子，成纤维生长因子，血小板衍生生长因子，转化生长因子，胰岛素铁硒传递蛋白添加到基础培养基中，使得添加剂在基础培养基中的最终浓度为：维生素C：233μM～287μM；亚油酸：3.7μM～8.9μM；胆固醇：9μM～17μM；地塞米松：6nM～15nM；乙酰半胱氨酸：43μM～58μM；转铁蛋白：18μg/mL～32μg/mL；亚硒酸钠：22nM～52nM；泛酸钠：13μM～24μM；生物素：28μM～43μM；胰岛素样生长因子：7μg/mL～18μg/mL；表皮生长因子：2ng/mL～9ng/mL；成纤维生长因子：2ng/mL～9ng/mL；血小板衍生生长因子：2ng/mL～9ng/mL；转化生长因子：30ng/ml～70ng/ml；胰岛素铁硒传递蛋白：1％；步骤二：用步骤一配制溶剂分别溶解纤维蛋白、胶原蛋白、透明质酸和凝血酶，其中浓度为：纤维蛋白100mg/ml；胶原蛋白25mg/ml；透明质酸5％；凝血酶50U/ml；步骤三：在微骨折手术中，将步骤二中配制的四种溶剂混合注射进病人软骨缺损部位；纤维蛋白和凝血酶混合时，模拟凝血链级反应的最后一步，通过凝血酶对纤维蛋白原的激活作用，使纤维蛋白原逐渐聚合，最终形成纤维蛋白固化物；胶原蛋白的作用是模拟软骨细胞在体内的生长环境；透明质酸的作用是固定添加剂，使添加剂能有效存在基质中。