心脏型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒及其制备方法

摘要

本发明涉及一种心脏型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒及其制备方法；所述试剂盒包括试剂R1、试剂R2及标准品组成；所述试剂R1的组成为：溶剂是pH7.0～7.6的缓冲液、溶质为表面活性剂、螯合剂、加速剂、防腐剂和纯化水；所述试剂R2为抗人H‑FABP抗体胶乳试剂；所述标准品为所述标准品为含有定量H‑FABP的重组蛋白。本发明解决了目前市场上乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒抗干扰能力差、特异性低、试剂稳定性不好和检测线性范围窄等问题。另外，本发明试剂盒试剂在检测过程中具有操作简单、准确度高、重复性好、灵敏度高等特性，且能够在全自动生化分析仪或者特种蛋白仪以及分光光度计上使用，具有广泛的应用前景。

主权项

一种心脏型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1、试剂R2和标准品；所述试剂R1包括组分及含量如下：所述试剂R2包括组分及含量如下：所述标准品包括6支不同浓度H‑FABP重组蛋白、溶质及含量均相同的标准品溶液；试剂R1中，所述表面活性剂为非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂或两性表面活性剂；所述螯合剂包括乙二胺四乙酸二钠、氨基三乙酸、二亚乙基三胺五乙酸、二亚乙基三胺五乙酸盐中的一种或几种；所述加速剂包括葡聚糖4000～12000中的一种或几种；所述试剂R2的制备包括如下步骤：步骤1：将抗人H‑FABP抗体在pH值为4.0～6.0的溶液中进行酸化；步骤2：将步骤1所得抗人H‑FABP抗体溶液用碱溶液调节pH至7.4～8.2，加入粒径为100～300nm的聚乙烯基苄基氯胶乳悬浮溶液，在37℃孵育2～4小时；步骤3：将步骤2所得悬浮溶液用pH为7.0～8.5的封闭液在37℃封闭5个小时以上；所述封闭液的溶剂为50mmol/L MES缓冲液，溶质及其在所述封闭液中的含量为牛血清白蛋白0.1mg/ml、氯化钠150mM；步骤4：将步骤3所得悬浮溶液经离心或过滤后，取沉淀用含有稳定剂、无机盐、防腐剂的缓冲液洗涤分散即得；所述洗涤为高速冷冻离心机离心或者是用孔径小于100nm的中空纤维管状进行过滤；其中，所述步骤1中抗人H‑FABP抗体包括鼠抗人H‑FABP抗体、兔抗人H‑FABP抗体、羊抗人H‑FABP抗体中的一种；所述溶液包括甘氨酸缓冲液、盐酸溶液、MES缓冲液中的一种或多种。