一种携带人穿膜肽p53与GM-CSF基因的重组溶瘤腺病毒及其用途

摘要

本发明属于基因工程学和肿瘤学，涉及一种含人类穿膜肽p53基因和GM‑CSF基因的重组溶瘤腺病毒及其用途。具体地，本发明涉及一种重组溶瘤腺病毒载体，其可操作地插入或者包含下述外源基因：穿膜肽编码序列、p53基因或其简并序列、2A连接序列，以及GM‑CSF基因或其简并序列。本发明还涉及含有所述重组溶瘤腺病毒载体的重组溶瘤腺病毒。本发明的重组溶瘤腺病毒可高效感染肿瘤细胞（包括肿瘤干细胞），在肿瘤细胞内特异增殖、裂解肿瘤细胞，并高效表达人穿膜肽p53与GM‑CSF蛋白，促进肿瘤细胞凋亡，并通过增强免疫反应，发挥抗肿瘤作用。本发明提供的重组溶瘤腺病毒可用于多种类型恶性肿瘤的治疗。

主权项

一种重组溶瘤腺病毒载体，其可操作地插入或者包含依次连接的下述外源基因：组成型强启动子、穿膜肽编码序列、p53基因或其简并序列、2A连接序列、GM‑CSF基因或其简并序列、SV40PolyA、第一绝缘子序列；其中，所述穿膜肽编码序列为编码聚精氨酸穿膜肽的序列，所述穿膜肽编码序列插入到p53基因的起始密码子的后面，并且所述穿膜肽编码序列和p53基因起始密码子之间连接有编码一个甘氨酸的序列；所述外源基因可操作地连接或插入在腺病毒E1B区；腺病毒E1B区19KDa与55KDa蛋白编码序列缺失；腺病毒E1A的启动子为人端粒酶逆转录酶启动子；其中，编码一个甘氨酸、穿膜肽和p53基因的序列如SEQ ID NO：4所示。