发明名称 |
一种用于沉默镰刀菌内源基因的沉默载体及其应用 |
摘要 |
本发明公开了一种用于沉默镰刀菌内源基因的沉默载体及其应用,所述沉默载体包括原始载体以及插入所述原始载体的正向沉默片段和反向沉默片段,所述原始载体为PFsilent‑1,或潮霉素抗性基因替换为G418抗性基因的载体PFsilent‑1;所述正向沉默片段插入所述原始载体中内含子上游的多克隆位点,所述反向沉默片段插入所述原始载体中内含子下游的多克隆位点。本发明还公开了所述沉默载体在沉默镰刀菌内源基因中的应用。本发明构建了能用于适用于禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌等镰刀菌基因沉默的沉默载体及高效遗传转化体系;利用本发明建立的沉默载体和转化体系,能使靶基因的表达量降低约80‑90%。 |
申请公布号 |
CN103820482B |
申请公布日期 |
2016.09.07 |
申请号 |
CN201410037594.3 |
申请日期 |
2014.01.26 |
申请人 |
浙江大学 |
发明人 |
陈云;高启迅;尹燕妮;马忠华 |
分类号 |
C12N15/63(2006.01)I;C12N1/14(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/63(2006.01)I |
代理机构 |
杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 |
代理人 |
胡红娟 |
主权项 |
一种用于沉默镰刀菌内源基因的沉默载体,包括原始载体以及插入所述原始载体的正向沉默片段和反向沉默片段,其特征在于,所述原始载体为pSilent‑1或pSilent‑1潮霉素抗性基因替换为G418抗性基因的载体pSilent‑1;所述正向沉默片段插入所述原始载体中内含子上游的多克隆位点,所述反向沉默片段插入所述原始载体中内含子下游的多克隆位点;所述正向沉默片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述反向沉默片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述的镰刀菌内源基因为禾谷镰刀菌cyp51A基因。 |
地址 |
310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 |