呕吐毒素的电化学检测方法

摘要

本发明公开了一种呕吐毒素的电化学检测方法，包括如下步骤：1)在玻碳电极上修饰单壁碳纳米管/壳聚糖复合物，晾干；2)抗原DON‑BSA连接到玻碳电极上：将电极用磷酸盐缓冲液冲洗，浸泡于EDC和NHS的混合溶液中，孵育，磷酸盐缓冲液冲洗，将牛血清白蛋白‑呕吐毒素偶联抗原滴涂于电极表面，孵育，冲洗，用牛血清白蛋白溶液封闭剩余活性位点；3)测定待测样品中的呕吐毒素含量：将过量的呕吐毒素抗体和待测样品溶液混合，滴加在玻碳电极表面，孵育，冲洗，加入碱性磷酸酶标记的二抗，孵育，冲洗，测定电化学信号，计算得到结果。本方法检测灵敏度高、检测范围宽、快速的、能够检测到超低含量呕吐毒素。

主权项

一种呕吐毒素的电化学检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1)在玻碳电极上修饰单壁碳纳米管/壳聚糖复合物：将玻碳电极抛光打磨，超纯水清洗，接着用丙酮和硝酸混合液清洗，再用超纯水冲洗，晾干，将单壁碳纳米管/壳聚糖分散液滴涂于电极表面，晾干；2)抗原DON‑BSA连接到玻碳电极上：将步骤1)晾干的电极用磷酸盐缓冲溶液冲洗，浸泡于EDC和NHS的混合溶液中，33～40℃孵育50～70分钟，然后用磷酸盐缓冲溶液冲洗玻碳电极，立即将牛血清白蛋白‑呕吐毒素偶联抗原滴涂于电极表面，33～40℃孵育50～70分钟，用磷酸盐缓冲溶液冲洗，用牛血清白蛋白溶液孵育封闭剩余的活性位点；3)测定待测样品中的呕吐毒素含量：将过量的呕吐毒素抗体和待测样品溶液混合，滴加在步骤2)处理过后的玻碳电极表面，33～40℃孵育75～100分钟，用磷酸盐缓冲溶液冲洗，加入碱性磷酸酶标记的二抗，33～40℃孵育75～100分钟，磷酸盐缓冲溶液冲洗，进行差分脉冲伏安扫描，测定碱性磷酸酶标记的二抗电化学信号，根据标准曲线即可得到待测样品中的呕吐毒素含量。