修饰的变体BOWMAN BIRK蛋白酶抑制剂

摘要

本发明涉及经修饰的变体BOWMAN BIRK蛋白酶抑制剂蛋白(BBPI)，所述抑制剂包含结合靶蛋白的肽，并且经过进一步修饰而具有比未修饰的BBPI大的蛋白酶抑制活性和/或以更大的产量生产。本发明涵盖了含有编码经修饰的变体BBPI的多核苷酸序列的多核苷酸构建体和表达载体，表达和生产所述经修饰的变体BBPI的转化宿主细胞，经修饰的变体BBPI蛋白，包含经修饰的变体BBPI的组合物，以及用于制造和在个人护理中使用经修饰的变体BBPI的方法。

主权项

分离的经修饰变体Bowman Birk蛋白酶抑制剂(BBPI)，其中，BBPI支架的第二个蛋白酶抑制环是结合肽，其中所述BBPI支架为由SEQ ID NO:187所示的BBIt‑AV，并且所述BBIt‑AV的位置41‑位置49处的结合肽选自VEGF结合肽、FGF‑5结合肽、TGFβ结合肽或TNFα结合肽；其中所述经修饰的变体BBPI中的氨基酸取代选自：1A、1C、4V、5P、5A、11G、13Y、13I、13F、13M、13L、13V、13K、13R、18I、18V、18L、25K、25N、25W、25I、25A、25R、27H、27K、27V、27A、27Q、29R、29K、29P、31Q、31H、31E、31A、31R、31W、31K、31T、38N、38K、38R、40H、40K、40Q、40R、40Y、50R、50Q、50K、50T、50V、50M、50S、52K、52T、52R、52Q、52L、52H、52A、52M、52S、52E、55M、65E、65Q或65D；或者F50T‑V52A、A40L‑F50N、A13I‑S25L‑F50T‑V52A、A13I‑S25L‑L29P‑F50T‑V52A、A13I‑S25L‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑L29P‑F50T‑V52A、A13I‑S25L‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑A40K‑F50T‑V52A、S25L‑F50T‑V52A、S25L‑L29P‑F50T‑V52A、S25L‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、S25L‑A40K‑F50T‑V52A、L29P‑F50T‑V52A、L29P‑A40K‑F50T‑V52A、A40K‑F50T‑V52A、A13I‑L29P‑F50T‑V52A、A13I‑S25K‑L29P‑V52K、D1C‑A13I‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、S4V‑A13I‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、S5P‑A13I‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、Q11G‑A13I‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、A13L‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑S25R‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑S25R‑L29P‑S31A‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑S25R‑L29P‑S31R‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑M27R‑L29P‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑L29K‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑L29P‑S31A‑A40K‑F50T‑V52AA13I‑L29P‑S31R‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑L29P‑S38N‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑L29P‑A40K‑F50K‑V52A、A13I‑L29P‑A40K‑F50T‑V52T、A13I‑L29P‑S38N‑A40K‑F50T‑V52A、A13I‑S25R‑M27A‑L29P‑S31A‑F50K‑V52T、A13I‑S25R‑M27A‑L29P‑S31A‑A40H‑F50K‑V52T、A13I‑S25K‑M27A‑L29R‑S31E‑A40K‑F50Q‑V52Q、A13I‑S25K‑M27R‑L29E‑S31A‑A40H‑F50R‑V52K、A13I‑S25K‑M27A‑L29R‑S31A‑A40H‑F50R‑V52L、A13I‑S25K‑M27Q‑L29P‑S31E‑A40H‑F50R‑V52Q，或A13I‑S25R‑M27A‑L29P‑S31A‑F50K‑V52T；其中所述的氨基酸位置选自等价于SEQ ID NO:187的1、4、5、11、13、18、25、27、29、31、38、40、50、52、55和65位的位置。