一种大麦脂肪氧化酶(LOX-1)合成缺陷基因的多态性分子标记方法

摘要

本发明为一种大麦种资资源的分子标记方法，属于植物分子育种领域。大麦种质资源进行磨粉和酶液粗提，并用化学显色的方法进行LOX-1活性鉴定，最终筛选出LOX-1活性缺失的自然变异材料。根据已经报道的LOX-1基因序列，设计基因特异性引物，对自然变异和活性正常材料的基因组DNA进行PCR扩增利克隆测序，最终确定导致LOX-1活性缺失的突变位点；同时，从发芽后的大麦组织中提取mRNA，反转录为cDNA，对上述功能突变材料的LOX-1基因进行测序，并将筛选出的目的基因进行序列比对和功能缺失原因分析，进一步开发出改功能位点的多态性分子标记，实验验证该分子标记用于辅助育种的可靠性和有效性。

主权项

一种用于检测大麦脂肪氧化酶LOX‑1基因多态性分子标记的引物对组合，其特征在于，所述引物对组合包含两组引物对，其中，用于检测G型SNP的引物对为RNR/Lox1.FL.2F，其核苷酸序列如下所示：RNR：5’‑CACTAGTGATTCTGCGAGTGTGGAGCCC‑3’，Lox1.FL.2F：5’‑CGCCAACTCATGGATCTACC‑3’；用于检测C型SNP的引物对为RNF/Lox1.FL.1R，其核苷酸序列如下所示：RNF：5’‑AAAACATAACTTTTTAATAGTAATGTTGCAC‑3’，Lox1.FL.1R：5’‑TGATGGAGTAGCCCAGGAAG‑3’。