一种测定大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b毒性的分子方法

摘要

一种测定大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b毒性的分子方法，包括以下步骤：将待检测大豆疫霉菌接种于大豆叶片上，12小时后提取待检测大豆疫霉菌的总RNA；以提取的总RNA为模版进行逆转录，得到cDNA反应液；采用毒性检测引物AVR1BR2F/ AVR1BR2R，以所得cDNA反应液为模版进行实时荧光定量PCR，如果在实时荧光定量PCR扩增过程中能够检测到无毒基因Avr1b‑1的转录，则对应的待检测大豆疫霉菌为无毒菌株，否则为毒性菌株。本发明能够快速准确的测定出待检测大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b的毒性，并为大量、快速和准确鉴定大豆疫霉菌的生理小种或致病型提供有力支持。

主权项

一种测定大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b毒性的分子方法，其特征在于：包括以下步骤：将待检测大豆疫霉菌接种于大豆叶片上，12小时后提取待检测大豆疫霉菌的总RNA；以提取的总RNA为模版进行逆转录，得到cDNA反应液；采用毒性检测引物AVR1BR2F/ AVR1BR2R，以所得cDNA反应液为模版进行实时荧光定量PCR，如果在实时荧光定量PCR扩增过程中能够检测到无毒基因Avr1b‑1的转录，则对应的待检测大豆疫霉菌为无毒菌株，否则为毒性菌株；所述毒性检测引物AVR1BR2F/ AVR1BR2R的核苷酸序列如下：AVR1BR2F：5ˊ‑GAGCTCATGAAGAGGACGAT‑3ˊ；AVR1BR2R：5ˊ‑TCTTATCCAGGCTGTACCCC‑3ˊ。