一种检测人类Y染色体微缺失的试剂盒

摘要

本发明涉及染色体缺失检测领域，具体涉及一种检测人类Y染色体微缺失的试剂盒。本发明确定最优的STS分布及PCR扩增体系，将15个STS分配到4管中设计特定的引物，进行多重PCR扩增，建立了一种符合2013版EAA/EMQN指南要求的Y染色体微缺失检测测试剂盒，所述试剂盒检测特异性强、灵敏度高和条带均一性好。实现一次试验即可检测和确证Y染色体的微缺失类型，满足2013版EAA/EMQN指南的“基本分析”和“拓展分析”要求，可方便快速地为Y染色体微缺失的临床处理提供科学、全面的依据。

主权项

一种检测人类Y染色体微缺失的试剂盒，其特征在于，包括PCR反应液Ⅰ、PCR反应液Ⅱ、PCR反应液Ⅲ和PCR反应液Ⅳ；所述PCR反应液Ⅰ包括：特异性扩增ZFX/Y位点的引物，特异性扩增Y染色体sY254位点、sY105位点、sY1192位点、sY88位点的引物；所述ZFX/Y位点的序列如：SEQ ID NO：1；所述sY254位点的序列如：SEQ ID NO：2；所述sY105位点的序列如：SEQ ID NO：3；所述sY1192位点的序列如：SEQ ID NO：4；所述sY88位点的序列如：SEQ ID NO：5；所述PCR反应液Ⅱ包括：特异性扩增ZFX/Y位点的引物，特异性扩增Y染色体sY84位点、sY127位点、sY1065位点、sY153位点的引物；所述sY84位点的序列如：SEQ ID NO：6；所述sY127位点的序列如：SEQ ID NO：7；所述sY1065位点位点的序列如：SEQ ID NO：8；所述sY153位点的序列如：SEQ ID NO：9；所述PCR反应液Ⅲ包括：特异性扩增ZFX/Y位点的引物，特异性扩增Y染色体sY86位点、sY160位点、sY121位点、sY255位点的引物；所述sY86位点的序列如：SEQ ID NO：10；所述sY160位点的序列如：SEQ ID NO：11；所述sY121位点的序列如：SEQ ID NO：12；所述sY255位点的序列如：SEQ ID NO：13；所述PCR反应液Ⅳ包括：特异性扩增ZFX/Y位点的引物，特异性扩增Y染色体SRY位点、sY254位点、sY82位点、sY1064位点的引物；所述SRY位点的序列如：SEQ ID NO：14；所述sY254位点的序列如：SEQ ID NO：15；所述sY82位点的序列如：SEQ ID NO：16；所述sY1064位点的序列如：SEQ ID NO：17；所述PCR反应液Ⅰ包括：特异性扩增ZFX的引物，序列如：SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：19所示；特异性扩增ZFY的引物，序列如：SEQ ID NO：20和SEQ ID NO：21所示；特异性扩增Y染色体sY254位点的引物，序列如：SEQ ID NO：22和SEQ ID NO：23所示；特异性扩增Y染色体sY105位点的引物，序列如：SEQ ID NO：24和SEQ ID NO：25所示；特异性扩增Y染色体sY1192位点的引物，序列如：SEQ ID NO：26和SEQ ID NO：27所示；特异性扩增Y染色体sY88位点的引物，序列如：SEQ ID NO：28和SEQ ID NO：29所示；所述PCR反应液Ⅱ包括：特异性扩增ZFX的引物，序列如：SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：19所示；特异性扩增ZFY的引物，序列如：SEQ ID NO：20和SEQ ID NO：21所示；特异性扩增Y染色体sY84位点的引物，序列如：SEQ ID NO：30和SEQ ID NO：31所示；特异性扩增Y染色体sY127位点的引物，序列如：SEQ ID NO：32和SEQ ID NO：33所示；特异性扩增Y染色体sY1065位点的引物，序列如：SEQ ID NO：34和SEQ ID NO：35所示；特异性扩增Y染色体sY153位点的引物，序列如：SEQ ID NO：36和SEQ ID NO：37所示；所述PCR反应液Ⅲ包括：特异性扩增ZFX的引物，序列如：SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：19所示；特异性扩增ZFY的引物，序列如：SEQ ID NO：20和SEQ ID NO：21所示；特异性扩增Y染色体sY86位点的引物，序列如：SEQ ID NO：38和SEQ ID NO：39所示；特异性扩增Y染色体sY160位点的引物，序列如：SEQ ID NO：40和SEQ ID NO：41所示；特异性扩增Y染色体sY121位点的引物，序列如：SEQ ID NO：42和SEQ ID NO：43所示；特异性扩增Y染色体sY255位点的引物，序列如：SEQ ID NO：44和SEQ ID NO：45所示；所述PCR反应液Ⅳ包括：特异性扩增ZFX的引物，序列如：SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：19所示；特异性扩增ZFY的引物，序列如：SEQ ID NO：20和SEQ ID NO：21所示；特异性扩增Y染色体短臂SRY位点的引物，序列如：SEQ ID NO：46和SEQ ID NO：47所示；特异性扩增Y染色体sY254位点的引物，序列如：SEQ ID NO：48和SEQ ID NO：49所示；特异性扩增Y染色体sY82位点的引物，序列如：SEQ ID NO：50和SEQ ID NO：51所示；特异性扩增Y染色体sY1064位点的引物，序列如：SEQ ID NO：52和SEQ ID NO：53所示。