血清或血浆中25-羟基维生素D液相色谱串联质谱检测方法及试剂盒

摘要

本发明提供了一种血清或血浆中25‑羟基维生素D液相色谱串联质谱检测方法，包括如下步骤：(1)样本前处理：往离心管内加入内标溶液10μl和人血清200μl，混合均匀，然后加600μl丙酮，混合均匀，低温静置15分钟后置于离心机上，以13000rpm转速离心5分钟；取上清液于第二离心管中，50℃氮气吹干后加入200μl乙腈复溶，混合均匀后置于离心机上，以13000rpm转速离心2‑4分钟，取上清液；(2)检测方法为液相色谱串联质谱法，其中采用的是多反应监测MRM扫描方式。本发明通过对前处理方法的改良，前处理更加简单、快捷，可实现批量处理。

主权项

血清或血浆中25‑羟基维生素D液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)样本前处理：往离心管内加入内标溶液10μl和人血清或血浆200μl，混合均匀，然后加400‑800μl丙酮，混合均匀，低温静置15‑25分钟后置于离心机上，以13000rpm转速离心5分钟；取上清液于第二离心管中，氮气吹干后加入200μl乙腈复溶，混合均匀后置于离心机上，以13000rpm转速离心2‑4分钟，取上清液；(2)检测方法为液相色谱串联质谱法，其中采用的是多反应监测MRM扫描方式，所述色谱条件如下：色谱柱：4.6×30mm，3.5μm；初始流动相的流速为1ml/min，柱温30℃，检测时间为6min，进样量为50μl；采用梯度洗脱方式，洗脱参数见表1；表1为梯度洗脱参数所述流动相A为体积比为0.05％甲酸水溶液，流动相B为纯甲醇；25‑羟基维生素D3的保留时间为3.3min；25‑羟基维生素D2的保留时间为3.5min；所述多反应监测MRM质谱相关参数见表2，表2为质谱参数