一种舒洛地特组分精细结构分析检测方法

摘要

本发明公布了一种舒洛地特组分精细结构检测方法，包括：(1)肝素组分结构解析：硫酸软骨素ABC酶酶解硫酸皮肤素后进行肝素组分完整糖链分析，再经肝素酶I部分酶解后进行肝素糖链分析，或经肝素酶I、II、III全酶解后进行肝素二糖分析；(2)肝素组分特征基团结构解析：肝素酶I酶解肝素后经P10柱进行寡糖分离收集，然后用凝胶G25脱盐柱脱盐后用质谱进行肝素特征基团结构解析；(3)硫酸皮肤素组分结构解析：用亚硝酸钠降解肝素组分后，再用硫酸软骨素ABC酶酶解硫酸皮肤素，进行硫酸皮肤素二糖分析。本发明分析准确、重现性好，可改进现有理化检测分析手段的不足。

主权项

一种进行舒洛地特组分精细结构确定的分析方法，包含对硫酸皮肤素及肝素组分的酶解、分离，最后采用高效液相色谱或液质联用检测方法进行肝素组分及硫酸皮肤素组分结构分析，其特征在于：肝素组分结构分析：先用硫酸软骨素ABC酶对硫酸皮肤素组分进行特异性酶解得到肝素组分，其次用肝素酶I进行部分酶解，得到肝素寡糖及部分二糖；或用肝素酶I、II、III进行完全酶解得到二糖后进行肝素组分结构分析；肝素组分特征基团结构解析：首先用肝素酶I轻度降解肝素组分，再用Bio‑Gel P10自装凝胶柱进行寡糖分离并依次收集各组分，最后用交联葡聚糖凝胶G25自装脱盐柱分别脱盐后，用质谱对肝素各组分精细结构进行解析；硫酸皮肤素组分解析：先用亚硝酸钠降解肝素，得到硫酸皮肤素组分，然后用硫酸软骨素ABC酶酶解硫酸皮肤素，进行其二糖结构分析。