主权项 |
一种用于地沟油检测的试剂盒,包括—检测引物溶液:由浓度为4~6 µmol/L的外引物Ⅰ、浓度为4~6 µmol/L的外引物Ⅱ、浓度为32~48 µmol/L的内引物Ⅰ和浓度为32~48µmol/L的内引物Ⅱ配制而成;所述外引物Ⅰ的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2第1位到18位所示;所述外引物Ⅱ的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.3第1位到18位所示;所述内引物Ⅰ的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.4第1位到44位所示;所述内引物Ⅱ的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.5第1位到46位所示;—具有链置换活性的Bst DNA聚合酶:浓度为7~9U/μL;—10×反应缓冲液:由200 mmol/L且pH= 8.8的Tris‑HCl,100 mmol/L KCl,100 mmol/L (NH<sub>4</sub>)<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>,40~100 mmol/L MgSO<sub>4</sub>,6~14 mol/L 甜菜碱混合而成;—dNTPs 溶液:由浓度分别为10 mmol/L 的 dATP、dCTP、dGTP、dTTP 四种脱氧核糖核苷酸溶液等体积混合而成;—阳性 DNA 对照样品:含有脊椎动物线粒体高度保守DNA序列的大肠杆菌质粒 DNA,或者食品中常见的猪、牛、羊、鸡、鸭和鱼的总DNA样品;所述脊椎动物线粒体高度保守DNA序列的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1第1位到259位所示;—阴性 DNA 对照样品:不含脊椎动物线粒体高度保守DNA序列的 DNA。 |