一种基于丝素蛋白的三维细胞支架的制备方法

摘要

本发明公开了一种基于丝素蛋白的三维细胞支架的制备方法，所述三维细胞支架是一种内部含有均一的孔隙的丝素蛋白网络结构；其使用微流控装置制备尺寸均一的单分散微球，然后利用单分散微球的自组装功能制备蛋白质结构的模板，再将丝素蛋白溶液灌注到模板中，冷冻干燥后去除模板得到这种内部具有均一孔隙的网络状丝素蛋白三维细胞支架。本发明提供的三维细胞支架构建方法，操作简单，成本低廉，制备的三维细胞支架具有优异的机械性能，生物相容性，生物可降解性。

主权项

一种基于丝素蛋白的三维细胞支架的制备方法，其特征在于所述方法按以下步骤实现：（1）丝素蛋白溶液的提取：对生蚕茧进行清洗，利用盐析、透析、浓缩，从生蚕茧中提取从3wt%‑15wt%的丝素蛋白水溶液；（2）微米级单分散性微球的制备步骤：利用微流控装置、非连续相和连续相制备粒径可控的单分散微球，对制备的单分散微球进行清洗并收集；（3）单分散微球的模板制备和复制：利用化学气相沉积法将步骤（2）中制备的单分散微球自组装成蛋白石结构模板，再将步骤（1）中提取的丝素蛋白溶液灌注到蛋白石结构的模板中，最后通过超声凝胶或冷冻干燥将其固化；（4）三维细胞支架的收集处理：将固化后的丝素蛋白收集并清洗，利用去除剂去除模板中的单分散微球，并最终形成内部含相通空腔的网络状三维细胞支架。