发明名称 |
快速选育猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞系的方法及专用引物 |
摘要 |
本发明公开了一种用逆转录PCR(RT‑PCR)技术和实时荧光定量RT‑PCR技术快速选育猪瘟兔化弱毒株(C株)ST(猪睾丸)敏感细胞系的方法。包括1)获得ST单克隆细胞;2)接种猪瘟兔化弱毒株(C株);3)提取连续收获的各批次猪瘟兔化弱毒液(病毒液)的RNA,用RT‑PCR技术确定ST单克隆细胞系能够持续感染猪瘟兔化弱毒(C株);4)用实时荧光定量RT‑PCR技术确定拷贝数在10<sup>6</sup>拷贝(copies)/mL以上的为猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞系。本发明能够快速的为猪瘟弱毒疫苗的生产提供敏感细胞系,缩短了疫苗生产周期并降低了疫苗成本。 |
申请公布号 |
CN105886662A |
申请公布日期 |
2016.08.24 |
申请号 |
CN201610053986.8 |
申请日期 |
2016.01.26 |
申请人 |
金宇保灵生物药品有限公司 |
发明人 |
商晓桂;张贵刚;郝鹏;魏学峰;刘国英;范秀丽;韩志玲;宋志刚;孔彩萍;王艳杰 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 |
代理人 |
鲁兵 |
主权项 |
快速选育猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞系的方法,主要包括以下步骤:1)获得ST单克隆细胞;2)接种猪瘟兔化弱毒株(C株);3)提取连续收获的各批次猪瘟兔化弱毒液(病毒液)的RNA,用RT‑PCR技术进行初步鉴定,确定ST单克隆细胞系能够持续感染猪瘟兔化弱毒(C株);4)用实时荧光定量RT‑PCR技术定量检测猪瘟兔化弱毒液,以确定猪瘟兔化弱毒株(C株)的拷贝数,确定猪瘟兔化弱毒株(C株)能够持续感染细胞,并且在第三批次以及以后批次收获的病毒液的拷贝数能够维持在10<sup>6</sup>拷贝(copies)/mL的确定为猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞系。 |
地址 |
010030 内蒙古自治区呼和浩特市鄂尔多斯西街58号 |