一种长筒石蒜种子离体培养的方法

摘要

本发明公开一种长筒石蒜种子离体培养的方法，包括以下步骤：步骤一、受精子房的选取及消毒灭菌：保留盛开的长筒石蒜花的完整的受精子房；将受精子房表皮洗涤干净后放置在超净工作台上进行灭菌；步骤二、受精子房的离体培养：将消毒灭菌后的受精子房放入第一培养基中培养直至受精子房发育成饱满的蒴果；步骤三、种子的离体培养：将饱满的蒴果放入第二培养基中继续培养直至种子成熟；步骤四、种子的萌发：将成熟种子的种皮去除，然后将去除种皮的种子放入第三培养基中培养直至种子萌芽；本发明的优点是：能够将受精子房离体培育成成熟种子及种苗，从而大大提高了长筒石蒜的繁殖率，还能有效提高远缘杂交的成功率。

主权项

一种长筒石蒜种子离体培养的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、受精子房的选取及消毒灭菌：选取盛开的长筒石蒜花并将长筒石蒜花的花被片及花托去除、仅保留完整的受精子房；将完整的受精子房表皮洗涤干净后放置在超净工作台上进行灭菌：用质量百分比浓度为75±2%的酒精漂洗30±5秒；接着使用无菌水清洗3～5遍，每遍冲洗30±5秒；再用含次氯酸钠的无菌水冲洗4～5遍，每遍冲洗20～30秒，最后用无菌滤纸将受精子房表皮的水分去除干净；所述的含次氯酸钠的无菌水中的次氯酸钠的质量百分比浓度为1±0.2%；步骤二、受精子房的离体培养：将消毒灭菌后的受精子房放入第一培养基中培养至受精子房发育成饱满的蒴果：培养温度为25±1℃，光照强度1000～3000lx，每天的光照时间为12±1小时，培养时间为30～40天；所述的第一培养基由MS基本培养基、6‑苄基腺嘌呤、萘乙酸和蔗糖组成，具体配比为：在MS基本培养基中添加有6±0.2mg/L的6‑苄基腺嘌呤、0.5±0.1mg/L的萘乙酸和30±2g/L的蔗糖；第一培养基的PH值为5.8～6；步骤三、种子的离体培养：将饱满的蒴果放入第二培养基中继续培养至种子成熟：培养温度为25±1℃，光照强度1000～3000lx，每天的光照时间为12±1小时；所述的第二培养基由MS基本培养基、6‑苄基腺嘌呤、萘乙酸和蔗糖组成，具体配比为：在MS基本培养基中添加有6±0.2mg/L的6‑苄基腺嘌呤、0.5±0.1mg/L的萘乙酸和30±2g/L的蔗糖；第二培养基的PH值为5.8～6；步骤四、种子的萌发：将饱满的成熟种子的种皮去除，然后将去除种皮的种子放入第三培养基中培养至种子萌芽：培养温度为25±1℃，光照强度1000～3000lx，每天的光照时间为12±1小时；所述的第三培养基由1/2MS基本培养基、赤霉素、6‑苄基腺嘌呤组成，具体配比为：在1/2MS基本培养基中添加有0.3±0.1g/L的赤霉素、1.5±0.2mg/L的6‑苄基腺嘌呤,第三培养基的PH值为5.8～6。