一种异源表达和纯化神经系统转运蛋白GAT1的方法

摘要

本发明公开了一种异源表达和纯化神经系统转运蛋白GAT1的方法，该方法主要包括步骤：构建GFP-GAT1融合蛋白杆状病毒表达载体；GFP-GAT1融合蛋白在昆虫细胞Sf9细胞中表达；确认GAT1基因在昆虫细胞中的表达；分离和纯化GFP-GAT1融合蛋白；鉴定分离纯化的GFP-GAT1融合蛋白。本发明的方法可应用于在昆虫细胞中表达高等动植物的膜蛋白，并且获得的蛋白质具有翻译后的修饰作用和生物活性。表达的膜蛋白对于研究其晶体结构和高通量药物筛选有应用价值。

主权项

一种异源表达和纯化神经系统转运蛋白GAT1的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)构建诱导型GFP‑GAT1融合蛋白表达载体；(2)将GFP‑GAT1融合蛋白表达载体继续构建Bacmid；(3)GFP‑GAT1融合蛋白在昆虫细胞Sf9中表达；(4)确证GAT1基因在昆虫细胞中得到表达；(5)分离和纯化GFP‑GAT1融合蛋白；(6)检测分离纯化的GST‑CCR5融合蛋白；(7)鉴定分离纯化的GFP‑GAT1融合蛋白。