一种深层液态发酵生产安络小皮伞胞外多糖的方法

摘要

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种深层液态发酵生产安络小皮伞胞外多糖的方法。具体的说是一种工业化规模的安络小皮伞胞外多糖的生产方法，该方法是将活化好的安络小皮伞菌种通过接入到种子罐进行扩配，再将扩配好的液体种子接入到特制的产多糖的液态培养基中进行发酵，然后将发酵液进行分离，提取胞外多糖。本发明针对上述现有技术的不足进行研究，在小试和中试继续优化发酵培养基(尤其是碳源)、提升生物量和胞外多糖的基础上，解决了由小试放大到工业化生产中遇到的发酵过程参数控制、提取设备选型、优化等难题，最终成功嫁接到10‐20t发酵罐进行产业化生产，并顺利生产出高品质的安络小皮伞多糖，真正实现了连续、自动化、产业化的生产。

主权项

一种制备安络小皮伞发酵液的方法，其特征在于将安络小皮伞种子培养液接入灭菌后的发酵培养基，接种量为10~20%，通风比为1：0.5‑1.5vvm，罐压0.02～0.05Mpa，在22~30℃下发酵培养3~5天，得到安络小皮伞发酵液；其中所述的发酵培养基配方为：葡萄糖1‑3%、淀粉1‑3%、酵母粉0.2‑1%、玉米浆0.5‑2%、磷酸二氢钾0.1‑0.5%、七水硫酸镁0.1‑0.5%、消泡剂0.01‑0.05%、20000u/ml的耐高温α‑淀粉酶0.001‑0.007%v/v，调节pH值6.5‑7.5；其中，所述的安络小皮伞种子培养液通过以下方法制备得到：1）一级种子培养：将经活化摇瓶菌种接入灭菌后的液体种子培养基，接种量为0.1~2%，通风比为1：0.5‑1.5vvm，罐压0.02～0.05Mpa，在22~30℃下培养5~6天，得到安络小皮伞一级种子培养液；2）二级种子培养：将步骤1）所得的一级种子培养液接入灭菌后的液体种子培养基，接种量为10~20%，通风比为1：0.5‑1.5vvm，罐压0.02～0.05Mpa，在22~30℃下培养3~4天，得到所述的安络小皮伞种子培养液；所述的液体种子培养基配方为：葡萄糖2‑4%、蚕蛹粉0.1‑0.5%、黄豆饼粉1‑3%、磷酸二氢钾0.1‑0.5%、七水硫酸镁0.1‑0.5%、消泡剂0.01‑0.05%，调节pH值6.5‑7.5。