一种含细胞纳米纤维支架的制备方法

摘要

本发明涉及一种含细胞纳米纤维支架的制备方法。该方法可实现可降解生物材料和细胞集成加工，直接利用高压电喷含细胞的纳米纤维支架。具体步骤为：（1）用去离子水配制水溶性可降解高分子聚合物成均一溶液，再加入β‑TCP粉末进行混合用震荡球磨机研磨；（2）将上述材料高温蒸汽消毒；（3）将细胞悬液加入到上述消毒后的材料里面，搅拌均匀；（4）用注射器抽取上述含细胞的材料置于微量泵，开启高压电源和微量泵，设置好相应的工艺参数进行电喷，最后得到含细胞的纳米纤维支架。本发明整个制备方法简单易行，对骨缺损等快速修复具有重大的现实意义。

主权项

一种含细胞纳米纤维支架的制备方法，纳米纤维支架由水溶性可降解的高分子聚合物和细胞组成，利用电喷技术一次性制备，其特征在于，包括以下步骤：1）用电子天秤称取1.5‑2.0克水溶性可降解的高分子聚合物，在搅拌情况下缓缓加入到15‑20克的去离子水中，至充分溶胀后升温到80‑100℃加速溶解，并保温3小时，制得均一的高分子溶液后，再加入0.10‑0.20克的β‑TCP粉末进行混合，并用震荡球磨机研磨2小时；2）将上述材料在120℃高温蒸汽消毒；3）将第4代人的干细胞用0.25%的胰蛋白酶消化后收集在50mL离心管，1000 r/min离心5 min，弃上清液，将细胞悬液移至消毒后的上述材料，搅拌均匀，得到含细胞的高分子聚合物溶液；4）在电喷装置的注射器的针头上加载6‑8KV的直流电压，针头和直角不锈钢接收板之间的距离为7‑9cm，正极加载在注射器的针头上，负极加载在不锈钢垫板上；微量泵实现将含细胞的高分子聚合物溶液以150‑180ul/min稳定流量进行供料，纺丝1‑3个小时，最后得到含细胞的纳米纤维支架。