一种microRNA比色传感器的制备与应用

摘要

本发明提供了一种基于功能核酸的microRNA(miRNA)比色传感器，该传感器通过引入分子信标以实现对靶miRNA的高特异性的识别，通过链替代聚合反应（SDA）、nicking trigger引发的滚环扩增，及DNAzyme信号放大等生物放大策略实现对痕量miRNA高灵敏的检测。应用本发明的传感器对miRNA进行检测，miRNA的浓度在10aM‑1nM范围内呈线性关系，线性方程式为Y=0.5929+0.02916 LogX，相关系数为0.994，最低检测限为5aM。与现有技术比较，所述传感器灵敏度高、特异性好、成本低、操作简便，检测周期短，适用于实际样品的测定。

主权项

一种检测miRNA的比色传感器，包括扩增反应体系和催化反应体系，所述扩增反应体系中包括针对miRNA的茎环模板、哑铃状滚环模板、具有链置换活性的DNA聚合酶、限制性核酸内切酶、dNTP、缓冲体系；所述茎环模板是由分子信标MB和功能核酸GDNA杂交获得的MB/GDNA，所述分子信标MB的序列如SEQ ID NO.1所示，所述功能核酸GDNA的序列如SEQ ID NO.2所示；所述哑铃状滚环模板的序列如SEQ ID NO.3；所述催化反应体系包括Hemin、ABTS^2‑和H₂O₂。