发明名称 一种选择性抗肿瘤细胞活性的茯苓PCP蛋白及生产方法
摘要 本发明公开了一种选择性抗肿瘤细胞活性的茯苓PCP蛋白及其生产方法,该方法主要包括以下步骤:(1)克隆PCP基因;(2)构建真核表达载体并转化其到真核酵母宿主中;(3)通过筛选,得到高水平分泌表达的酵母转化子,酵母表达的PCP存在糖基化和非糖基化的两种形式;(4)利用摇瓶扩大培养,培养液上清经透析后经镍亲合层化得到高纯度的糖基化和非糖基化的PCP蛋白;(5)将纯化的重组PCP蛋白加入到培养的不同肿瘤细胞系中,该重组蛋白对骨肉瘤细胞U2OS、胃癌细胞MGC803等细胞株具有选择性抗肿瘤细胞活性。本发明首次利用毕赤酵母表达系统表达了具有选择性抗肿瘤细胞活性的一种新的茯苓免疫调节蛋白PCP,该方法既可以大量生产活性PCP蛋白,又为肿瘤的治疗增加了一种新的重组蛋白。
申请公布号 CN105884873A 申请公布日期 2016.08.24
申请号 CN201610428124.9 申请日期 2016.06.16
申请人 怀化学院 发明人 李洪波;吴东海
分类号 C07K14/375(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I 主分类号 C07K14/375(2006.01)I
代理机构 长沙星耀专利事务所 43205 代理人 许伯严
主权项 一种选择性抗肿瘤细胞活性的茯苓PCP蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
地址 418000 湖南省怀化市鹤城区怀东路180号