焦磷酸测序法快速检测华法林代谢酶基因多态性的试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种焦磷酸测序法快速检测华法林代谢酶基因多态性的试剂盒，该试剂盒中包含了3对特异扩增引物及3条测序引物，3对特异扩增引物为CYP2C9基因、VKORC1基因两种基因，其中CYP2C9基因含2对引物，3条测序引物具体涉及3个单核苷酸多态性，即CYP2C9*2、CYP2C9*3、VKORC1(‑1693)，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～9所示。本发明检测方法不仅灵敏度高，而且结果直观，判读更加简单、准确、快速，可以实现准确、快捷、高通量华法林代谢酶基因的检测，在个性化医疗上有较大的推广应用价值。

主权项

检测华法林代谢酶基因多态性的引物，其特征在于，包括如下引物：(1)扩增CYP2C9*2基因的引物对：其上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；(2)扩增CYP2C9*3基因的引物对：其上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；(3)扩增VKORC1基因的引物对：其上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；其中，下游引物SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6的5’端分别用生物素标记；CYP2C9*2测序引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；CYP2C9*3测序引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；VKORC1测序引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：9所示。