| 摘要 |
Panel primerů a způsob detekce genové exprese molekulárních markerů charakterizujících chondrogenní diferenciaci specifickou pro zvířecí model koně, při němž se s izolovanou DNA z cíleně diferencovaných koňských mesenchymálních buněk do chondrocytů (buněk chrupavky) provede polymerázová řetězová reakce (PCR) s použitím panelu primerů zahrnujícího alespoň jeden z oligonukleotidových primerových párů: ACAN F: 5´ - GCT CCG ACC GAT ACT CTC TG – 3´ (20-mer), ACAN R: 5´ - GGC TCA CAA TGG GGT ATC TG – 3´ (20-mer), pro detekci genové sekvence aggrecanu (ACAN); COL1A1 F: 5´ - AGG CCC TAA GGG TGA CAG AG – 3´(20-mer), COL1A1 R: 5´ - AGG ACC GCT AGG ACC AGT TT – 3´ (20-mer), pro detekci genové sekvence kolagenu typu I, alfa 1 (COL1A1); COL2A1 F: 5´ - AAG GCA AAG TTG GTC CCT CT – 3´ (20-mer), COL2A1 R: 5´ - GTC CCT TTT CAC CAG CTT TG – 3´ (20-mer), pro detekci genové sekvence kolagenu typu II, alfa 1 (COL2A1); SOX9 F: 5´ - TCA AGC AAG AAC AAG CCT CA – 3´ (20-mer), SOX9 R: 5´ - GCG GCT GGT ACT TGT AGT CC – 3´ (20-mer), pro detekci genové sekvence transkripčního faktoru SOX0 (SOX9); VCAN: 5´ - GCC CAA AAT GGG AAT ATC AA – 3´ (20-mer), VCAN: 5´ - CGC TCG GTA GTG AAA CAC AA – 3´ (20-mer), pro detekci genové sekvence versicanu (VCAN) a následně se provede elektroforéza produktů PCR reakce. Uvedené řešení umožňuje rychle, jednoduše a specificky detekovat buňky diferencované do chondrocytů pomocí specifických markerů v buněčných izolátech speciálně u živočišného druhu koně. |
