一种HPLC法测定L-半胱氨酸含量的方法

摘要

本发明公开了一种L‑半胱氨酸胶囊中L‑半胱氨酸含量的测定方法，用高效液相色谱法，采用正相硅胶键合二醇色谱柱，以混合溶剂为流动相的色谱法进行测定，用该方法可快速的测定样品中L‑半胱氨酸的含量。

主权项

一种高效液相色谱法测定样品中L‑半胱氨酸含量的测定方法，其特征在于采用正相硅胶键合二醇色谱柱，以混合溶剂为流动相的色谱法进行测定，所述的混合溶剂为乙腈和缓冲盐溶液的混合溶液，所述的乙腈和缓冲盐溶液的体积比例为75:25～85:15；分析L‑半胱氨酸胶囊中L‑半胱氨酸含量的方法包括以下步骤：(1)取L‑半胱氨酸对照品适量，精密称定，用pH为1.2的缓冲溶液溶解样品，得到1ml含L‑半胱氨酸0.20mg的溶液，作为对照品溶液；所述缓冲溶液由3.728gKCl和7mlHCl溶解于1000ml水中制得；(2)设置溶剂pH值为1.8～7.0，检验波长为200nm，色谱柱柱温箱为25～40℃；(3)取L‑半胱氨酸胶囊样品20粒，除去胶囊壳，得到内容物，用研钵研细，取相当于L‑半胱氨酸20mg的细粉，精密称定，置量瓶中，加入适量溶剂，在快速混匀器上震荡15min后，稀释至对照液的浓度，摇匀；用0.45μm的滤膜过滤，弃去初滤液后，取续滤液作为供试品溶液；(4)取对照品溶液和供试品20μl注入液相色谱仪，采用外标法计算L‑半胱氨酸的含量。