一种稻瘟病菌分生孢子的培养制备方法

摘要

本发明公开了一种稻瘟病菌分生孢子的培养制备方法，该方法利用多起点培养技术，以及气生菌丝产孢技术，快速培养制备稻瘟病菌分生孢子。该方法实施步骤如下：1)产孢培养基的制备；2)多起点移植菌体的配备；3)将多起点移植菌体植入培养平板；4)孢子制备培养；5)孢子的洗脱分离。本发明的特色与优点是：1)快速高效，通常培养5天后新一代孢子能达到高产孢量的理想状态；2)制备培养全程能保持无菌操作，成品孢子液的污染机率大幅降低；3)操作技术简单，结果产孢量大。

主权项

一种稻瘟病菌分生孢子的培养制备方法，其特征在于，利用多起点培养技术，以及气生菌丝产孢技术，快速培养制备稻瘟病菌分生孢子；方法的步骤如下：1)产孢培养基的制备：按常规方法制备产孢培养基，该培养基的组成为：燕麦167g，琼脂20g，水1000ml；常规高温灭菌，倒入9cm培养皿制成培养平板；2)多起点移植菌体的配备：在无菌条件下，用无菌水洗涤常规备存的稻瘟病菌菌落，得到孢子‑菌丝碎混合液，用该混合液作为制备新一代分生孢子的多起点移植菌体；3)将多起点移植菌体植入培养平板：用微量移液器将步骤2)配备的多起点移植菌体移植入步骤1)制备的培养平板，并使菌体液在平板面上分散均匀；4)孢子制备培养：将步骤3)操作完备后的制备培养平板转入温度为28℃、相对湿度为90％的恒温培养箱内暗培养；5)孢子的洗脱分离：通常步骤4)培养5天后，新一代分生孢子达到高产孢量的状态；用无菌水将平板上孢子洗脱，并集中到灭菌容器内，即获得较纯净的稻瘟病菌分生孢子液。