快速鉴定谷子抗烟嘧磺隆基因纯合、杂合、不抗型的方法

摘要

快速鉴定谷子抗烟嘧磺隆基因纯合、杂合、不抗型的方法，属于基因工程的技术领域，通过检测待测谷子中ALS基因第1877位脱氧核糖核苷酸来进行鉴定，采用能够扩增含有ALS基因第1877位碱基的引物对扩增待测谷子材料的基因组DNA，得到PCR扩增产物，用限制性内切酶酶切所述PCR扩增产物，得到大小不等的酶切产物片段，通过琼脂糖凝胶电泳查看酶切片段，鉴别纯合、杂合或敏感基因型，若酶切后为单条带，则待测谷子材料为不抗烟嘧磺隆谷子材料；若酶切后为两条带，则待测谷子材料为纯合抗烟嘧磺隆谷子材料；酶切后为三条带，则待测谷子材料为杂合抗烟嘧磺隆谷子材料。本方法简单，易操作，鉴定准确度高，成本低。

主权项

快速鉴定谷子抗烟嘧磺隆基因纯合、杂合、不抗型的方法，其特征在于，通过检测待测谷子材料中ALS基因第1877位的碱基进行鉴定，包括以下步骤：A、基因组PCR扩增：采用扩增引物以待测谷子材料的基因组DNA为模板，进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；B、酶切处理：用限制性内切酶酶切得到的PCR扩增产物，得到酶切产物片段；C、抗烟嘧磺隆基因的鉴定：通过琼脂糖凝胶电泳查看酶切产物片段，若酶切后为单条带，则待测谷子材料为不抗烟嘧磺隆谷子材料；若酶切后为两条带，则待测谷子材料为纯合抗烟嘧磺隆谷子材料；酶切后为三条带，则待测谷子材料为杂合抗烟嘧磺隆谷子材料。