主权项 |
一种通脱木组织培养快速繁殖方法,其特征在于,该方法步骤如下:(1)外植体的选取:选取通脱木幼叶、幼茎或幼芽作为外植体,将外植体先以70%体积浓度的酒精进行表面消毒10‑30s后,再以0.1%质量浓度的升汞消毒5‑12min,无菌水冲洗3‑5次;(2)愈伤组织诱导:将消毒后的外植体接入添加有1.5‑3.0mg/L NAA和1.0‑2.0mg/L 6‑BA的MS固体培养基中进行愈伤组织诱导培养20‑30天,培养条件:温度22‑26℃,光照每天14h,光照强度1400‑2000lx;(3)丛生芽的诱导:将培养好的愈伤组织或幼芽接种到添加有0.05‑0.20mg/L NAA和1.0‑2.0mg/L 6‑BA的MS固体培养基中,进行芽分化诱导培养20‑30天,培养条件:温度22‑26℃,光照每天14h,光照强度1400‑2000lx;(4)芽增殖与壮苗:将培养好的丛生芽接种到添加有0.04‑0.06mg/L NAA、1.0‑2.0mg/L 6‑BA、0.05‑0.5mg/L GA<sub>3</sub>的MS固体培养基中,进行芽苗增殖和壮苗培养15‑25天,培养条件:温度22‑26℃,光照每天14h,光照强度1400‑2000lx;(5)生根诱导:切取培养好的壮苗转接入添加有0.2‑0.4mg/L NAA的1/2MS固体培养基中,进行生根诱导培养15‑25天,获得生根的试管苗,培养条件:温度22‑26℃,光照每天14h,光照强度1400‑2000lx;(6)炼苗和移栽:将试管苗转移到炼苗室内,炼苗至完全成活后连同营养基质一起移栽到大田。 |