一种抗TNF-α类单克隆抗体的层析方法

摘要

本发明涉及一种抗TNF‑α类单克隆抗体的层析方法，属于生物技术领域。具体公开了一种TNF‑α类单抗纯化过程中去除宿主蛋白及多聚体的方法。采用离子交换与疏水复合层析的填料，使用低pH缓冲液清除污染物，然后使用更低pH洗脱缓冲液来洗脱目的抗体。本发明的技术方案，能去除一部分多聚体和大部分宿主蛋白，显著提高抗体纯度，价格更便宜且无proteinA脱落，简单方便，无需调节样品pH值与电导，适合于工艺放大及工业生产。

主权项

一种抗TNF‑α类单克隆抗体的层析方法，包括以下步骤：1)将抗TNF‑α类单抗组合物加载到复合层析材料上；2)用pH 7.0～7.4的第一清洗缓冲液清洗所述复合层析材料；3)用pH低于第一清洗缓冲液的的第二清洗缓冲液清洗所述复合层析材料；4)用pH低于第二清洗缓冲液、含有7～10mM的苯丁酸钠、0.05～0.3M尿素以及1～4％体积含量乙醇的洗脱缓冲液洗脱；其中，所述的抗TNF‑α类单抗组合物pH为6.0～7.0；所述的复合层析材料为离子交换作用和疏水作用的复合介质；所述的污染物包括宿主细胞蛋白。