发明名称 一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒及方法
摘要 本发明公开了一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒及提取方法,包括Lysis A液、Lysis B液、Lysis C液、磁珠悬液、结合液、wshing1液、wshing2液、洗脱液。利用本发明试剂盒提取植物组织基因组DNA回收率高、纯度高、片段完整、无PCR抑制物质。DNA提取从裂解、纯化到收集产物的全过程均可由仪器完成,自动化程度高,提取所使用的试剂高效安全,最大程度避免对人体的伤害。
申请公布号 CN103898092B 申请公布日期 2016.08.10
申请号 CN201410039630.X 申请日期 2014.01.27
申请人 西安天隆科技有限公司;山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 发明人 李红东;高宏伟;苗保刚;李明;彭年才;李政
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒,其特征在于:包括Lysis A液、Lysis B液、Lysis C液、磁珠悬液、结合液、wshing1液、wshing2液、洗脱液,其中,Lysis A液为1~2%CTAB,0.1~0.2mol/L氯化钠,10~20mmol/LEDTA,80~120mmol/L Tris‑HCL,pH=7.5~8.5;Lysis B液为10~20%β‑巯基乙醇;LysisC液为10~30mg/mL蛋白酶K;磁珠悬浮液由磁珠和含有10~20mmol/L氯化钠及0.01~0.05%NaN3的水溶液按1:30~50的重量比组成;结合液为5~10%PEG8000(聚乙二醇8000),2~4M GITC(异硫氰酸胍);washing1液为0.5~1mol/L GITC,0.1~0.2mol/L氯化钠,5~10mmol/L EDTA,20~40mmol/L Tris‑HCL,0.2%trionx‑100,pH=5.5~6.5;washing2液为5~10mmol/L EDTA,20~40mmol/L Tris‑HCL,0.1~0.2mol/L氯化钠,pH=5.5~6.5;洗脱液为0.5~1.5mmol/L EDTA,5~15mmol/L Tris‑HCL,PH=7.5~8.5;所述磁珠的直径为0.5~2μm。
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