一种从发酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工艺

摘要

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种从发酵液中高效提取γ‑聚谷氨酸的工艺，利用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)选择性沉淀发酵液中的γ‑PGA，然后将沉淀物在一定浓度的NaCl溶液中解离溶解、醇析、固液分离以及干燥等操作得到纯度较高的γ‑PGA。相对于现有技术，该工艺不仅可以提高了γ‑PGA提取效率和产品纯度，还可大量减少用于醇析的有机溶剂，使生产成本大大降低，具有良好的应用前景。

主权项

一种从发酵液中高效提取γ‑聚谷氨酸的工艺，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)：将微生物发酵得到的γ‑PGA发酵液通过孔径为1～50μm滤袋以及孔径为0.25～1μm的微孔过滤器过滤，或于高速离心机中离心分离，除去发酵液中大量的不溶性发酵残余营养物和菌体；步骤(2)：在步骤(1)离心后的发酵液中加入三氯乙酸调节pH值为3～5，去除发酵液中的杂蛋白；步骤(3)：在步骤(2)发酵液中加入1～30g/L硅藻土吸附发酵液中的残余菌体，过滤或离心分离出不溶物，再加入0.5～20g/L活性炭吸附发酵液中的色素和其它杂质，经过滤或离心分离获取上清液；步骤(4)：在步骤(3)处理后的发酵液中取样，即在步骤(3)中的上清液取样，测量及估算发酵液中γ‑PGA的含量；步骤(5)：根据步骤(4)测算的发酵液中γ‑PGA的含量，加入γ‑PGA的含量的1～5倍的CTAB，用NaOH溶液调节pH值为7～13，混合搅拌1～12h，使得CTAB与发酵液中γ‑PGA充分反应，然后离心分离得到不溶性CTAB/γ‑PGA复合物；步骤(6)：将步骤(5)收集得到的CTAB/γ‑PGA复合物置于NaCl溶液中，调节pH值为6～9，解离1～12h，得到含有γ‑PGA的澄清溶液；步骤(7)：于步骤(6)γ‑PGA澄清溶液中加入γ‑PGA澄清溶液体积的2～5倍的乙醇，在温度为4～10℃的条件下冷却静置12～24h，离心得沉淀物，然后将沉淀物冷冻干燥得到高纯度的γ‑PGA白色结晶。