鸭坦布苏病毒、减蛋综合症病毒和新城疫病毒的三重RT-PCR试剂盒

摘要

本发明公开了一种鸭坦布苏病毒、减蛋综合症病毒和新城疫病毒的三重RT‑PCR试剂盒，该试剂盒含有三对特异性引物。实验证明，应用本发明仅需一次RT‑PCR反应就能同时检测和鉴别鸭坦布苏病毒、减蛋综合症病毒和新城疫病毒三种病原体，具有特异性强、灵敏度高、低成本、高效率等优点；而且本发明在引物设计上利用扩增片段长度的不同可直接判定扩增结果，更简便、直观和实用。本发明的待测样品可来自健康动物或死亡动物，可为DNA和/或RNA，最低能同时检出100pg鸭坦布苏病毒RNA、10pg减蛋综合症病毒DNA和1ng新城疫病毒RNA，这为三种病毒的发病早期提供了准确的诊断结果，对切断其传播途径有重要意义，具有广阔的应用前景，对鸭养殖业可持续发展有着重要的现实意义。

主权项

一种鸭坦布苏病毒、减蛋综合症病毒和新城疫病毒的三重RT‑PCR试剂盒，其特征在于该试剂盒含有以下试剂：A液：引物组和One‑Step RT‑PCR试剂盒；引物组包括三对特异性引物，分别是引物1和2、引物3和4、引物5和6，所述引物组中引物1至4的浓度为25μM，引物5至6的浓度为15μM，各1μL，One Step RT‑PCR试剂盒包括2×one‑step reaction mix、TransScript one‑step emzyme mix和去离子水；B液：鸭坦布苏病毒cDNA、减蛋综合症病毒DNA和新城疫病毒cDNA，作为阳性对照；C液：去离子水，作为阴性对照；所述引物1和2、引物3和4、引物5和6，它们分别是序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.6的碱基序列。