一枝蒿活性成分的制备方法及其用途

摘要

本发明涉及一种一枝蒿活性成分的制备方法及其用途。该方法是将干燥的一枝蒿药材粉碎，经乙醇水溶液提取，再经聚酰胺树脂柱分离纯化，将洗脱部位用有机溶剂萃取，收集三氯甲烷层获得的样品用硅胶柱进行二次分离纯化，重结晶，即获得3个单体化合物，得率和含量分别为紫花牡荆素0.30mg/g，96%‑98%，6‑去甲氧基‑4′‑O‑甲基茵陈色原酮0.35 mg/g，97%‑99%，艾黄素0.06 mg/g，95%‑97%。经体外抗流感病毒的实验表明：通过本发明所述方法获得的一枝蒿活性成分具有一定的抗A/汉防/359/95(H3N2)流感病毒活性，是潜在的新型抗流感病毒先导化合物。本发明所述方法同时从一枝蒿中获取紫花牡荆素、6‑去甲氧基‑4′‑O‑甲基茵陈色原酮、艾黄素，其低成本、简便、高效、稳定。

主权项

一种一枝蒿活性成分的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：a、取干燥的一枝蒿药材，经粉碎，过10 目筛，置于圆底烧瓶中，加入8‑15倍重量的体积浓度为30‑75%乙醇水溶液进行提取，水浴加热温度50‑80℃，回流提取2‑5次，时间为1‑3小时/次，提取后的滤液经减压浓缩至相对密度为1.0‑1.5，得到浸膏备用；b、将步骤a中得到的浸膏，经真空干燥箱干燥，真空度‑0.08MPa，温度45‑70℃，得到一枝蒿提取物，备用；c、将步骤b得到的提取物与聚酰胺树脂为尼龙‑6或尼龙‑66或尼龙‑610树脂按重量比1:6‑1:10进行吸附，树脂柱径高比为1:3‑1:7，上样液提取物浓度为4%‑10%，上样流速为0.5‑3 BV/h，吸附后先用水洗脱聚酰胺树脂5‑10BV，洗脱流速0.5‑3 BV/h，再将水洗脱液弃去后，用体积比浓度为10‑95%的乙醇水溶液洗脱5‑10BV，流速为0.5‑3 BV/h，收集浓度为30‑60%梯度的乙醇洗脱液，经旋转蒸发仪浓缩，再经真空干燥箱干燥，粉碎，即得一枝蒿纯化物；d、将步骤c得到的一枝蒿纯化物用水混悬，用石油醚萃取弃去石油醚层，水层用三氯甲烷等体积萃取，收集三氯甲烷萃取液，经旋转蒸发仪浓缩至相对密度为1.0‑1.2，得到浸膏备用；e、将步骤d得到的一枝蒿纯化物浸膏与硅胶以重量比1:1‑1:3进行吸附并挥干，硅胶柱径高比为1:5‑1:10，湿法上样于硅胶柱，依次用体积比10:0‑0:10的石油醚:乙酸乙酯梯度洗脱，洗脱流速0.5‑3 BV/h，薄层色谱监测收集液，将同类物质合并，分别经旋转蒸发仪浓缩至相对密度为1.0‑1.5，压力为‑0.08MPa，温度为40℃‑60℃，溶剂常温挥干，加入甲醇溶解，常温挥发至析出晶体，滤过，得单体化合物，经结构鉴定分别为紫花牡荆素，得率0.30mg/g，含量在96%‑98%之间；6‑去甲氧基‑4′‑O‑甲基茵陈色原酮，得率0.35mg/g，含量在97%‑99%之间；艾黄素，得率0.06mg/g，含量在95%‑97%之间。