实时PCR检测中抗高温聚合酶核酸外切酶活性的荧光探针

摘要

实时PCR检测中抗高温聚合酶核酸外切酶活性的荧光探针，涉及一类荧光探针。提供在实时PCR检测中能够抵抗高温聚合酶核酸外切酶活性的一类荧光探针。是一类具有二级结构即包含互补序列的荧光探针，包含互补序列的荧光探针包括置换探针、分子信标探针、蝎子引物等。给出经修饰使其在实时PCR检测中能抗高温聚合酶每的5′→3′核酸外切酶活性且不产生非特异信号的荧光探针、经修饰使其在长片段实时PCR扩增检测中能抗高温聚合酶的3′→5′核酸外切酶活性且不产生非特异信号的荧光探针和经修饰使其在长片段实时PCR扩增检测中能同时抗5′→3′核酸外切活性和3′→5′核酸外切酶活性且不产生非特异信号的荧光探针。

主权项

实时PCR检测中抗高温聚合酶核酸外切酶活性的荧光探针，其特征在于是指具有二级结构即包含互补序列的荧光探针，所述的具有二级结构即包含互补序列的荧光探针包括置换探针、分子信标探针、蝎子引物、双链引物、Amplifluor^TM引物、LUX^TM引物或UT探针；所述的具有二级结构即包含互补序列的荧光探针是一种经修饰使其在实时PCR扩增检测中能够抵抗高温聚合酶的5′→3′核酸外切酶活性，且不产生非特异信号的荧光探针；所述的修饰的方式是使探针的5′端能抗核酸聚合酶的5′→3′核酸外切酶活性，修饰的方式包括修饰5′端碱基之间的连接；所述修饰5′端碱基之间的连接包括在修饰5′端碱基之间的连接情况下采用修饰的碱基衍生物，使用锁定核酸；或在修饰5′端碱基之间的连接的情况下增加化学功能团。