一种马鹿胰岛素样生长因子制备方法

摘要

本发明公开了一种马鹿胰岛素样生长因子制备方法，包括下列步骤：1)用deer‑IGF‑Ⅰ基因片段和PET44质粒构建重组质粒；2)对所述重组质粒进行扩增，并从中筛选出单克隆阳性的重组质粒；3)将单克隆阳性的重组质粒转化入BL21(DEa)大肠杆菌中得到重组子，在培养基中通过所述重组子进行deer‑IGF‑Ⅰ蛋白诱导表达；4)将所述重组子的菌体从所述培养基中分离，并在破菌液中，对所述重组子的菌体进行破菌，使deer‑IGF‑Ⅰ蛋白以可溶性融合蛋白的表达形式进入所述破菌液；5)对所述可溶性融合蛋白进行酶切，使所述可溶性融合蛋白分解为deer‑IGF‑Ⅰ蛋白和Nus蛋白；6)对deer‑IGF‑Ⅰ蛋白进行纯化、透析除盐和浓缩。

主权项

一种马鹿胰岛素样生长因子制备方法，包括下列步骤：1)用deer‑IGF‑I基因片段和PET44质粒构建重组质粒；2)对所述重组质粒进行扩增，并从中筛选出单克隆阳性的重组质粒；3)将单克隆阳性的重组质粒转化入BL21(DEa)大肠杆菌中得到重组子，在培养基中通过所述重组子进行deer‑IGF‑I蛋白诱导表达；4)将所述重组子的菌体从所述培养基中分离，并在破菌液中，对所述重组子的菌体进行破菌，使deer‑IGF‑I蛋白以可溶性融合蛋白的表达形式进入所述破菌液；5)对所述可溶性融合蛋白进行酶切，使所述可溶性融合蛋白分解为deer‑IGF‑I蛋白和Nus蛋白；6)对deer‑IGF‑I蛋白进行纯化、透析除盐和浓缩，得到deer‑IGF‑I蛋白。