一种检测人β-珠蛋白基因突变的方法

摘要

一种检测人β‑珠蛋白基因突变的方法，涉及一种检测人β‑珠蛋白基因突变的方法，尤其涉及一种改良分子信标熔解曲线检测β‑珠蛋白基因突变的方法。提供一种检测人β‑珠蛋白基因突变的方法。在β‑珠蛋白基因需要检测突变的区域设计并制备相应的改良分子信标；在设计好的改良分子信标的外围设计一条上游引物和下游引物，用该上游引物和下游引物对PCR扩增含有待检测区域的片段；PCR扩增结束后进行熔解曲线分析，根据改良分子信标的熔点的变化来判断待检测核酸序列是否具有基因突变以及可能的突变类型。

主权项

改良分子信标在制备检测人β‑珠蛋白基因突变的检测试剂中的用途，其特征在于应用改良分子信标的熔解曲线检测人β‑珠蛋白基因突变，包括以下步骤：1)在β‑珠蛋白基因需要检测突变的区域设计并制备相应的改良分子信标，所述改良分子信标在一个检测体系中的数目可以是单个也可以多个，所述的改良分子信标序列为：5′‑FAM‑CGGCTGGGCATAAAAGTCAGGGCCG‑BHQ‑3′，5′‑ROX‑CACGTTCCTGTGGGGCAAGGTGAACGTG‑DABCYL‑3′，5′‑HEX‑CGATCCAGGTTCTTTGAGTCCTTTGGGGATCG‑BHQ‑3′，5′‑FAM‑CGTGATAATTTCTGGGTTAAGGCAATAGCAATTATCACG‑BHQ‑3′，5′‑HEX‑CGGCTGGGCATAAAAGTCAGGGCCG‑BHQ‑3′，5′‑CAL FLUOR RED 635‑CGGTGAGGCCCTTGGCAGGTTGGTATCACCC‑BHQ‑3′；2)在改良分子信标的外围设计一对引物，并用该引物对PCR扩增含有待检测区域的片段；3)扩增结束后进行熔解曲线分析，根据改良分子信标的熔点的变化来判断待检测样本的核酸序列是否具有基因突变以及可能的突变类型，该熔点是指改良分子信标与靶杂交形成的双链结构的熔点。