发明名称 一种筛选肺血栓栓塞症中潜在的分子标记物的方法
摘要 本发明公开了一种筛选肺血栓栓塞症中潜在的分子标记物的方法,包括1)构建白兔的PTE模型;2)肺组织及血液收集;3)形态学分析;4)RNA的提取及基因表达分析;5)差异性表达基因的功能分析;6)逆转录聚合酶链反应和免疫印迹分析验证,获得潜在的分子标记物。本发明的筛选PTE中潜在的分子标记物的方法,首先建立兔自体血栓模型,随后分析兔急性肺血栓栓塞模型中基因表达的变化,最终筛选出PTE中潜在的分子标记物为IL‑8,TNF‑α,CX CL5和β‑actin。该方法确定肺栓塞过程中肺动脉基因表达的改变能用于判断疾病预后和用于评估PTE疾病严重程度,并为今后PTE的临床研究建立基础。
申请公布号 CN105803060A 申请公布日期 2016.07.27
申请号 CN201610153202.9 申请日期 2016.03.17
申请人 南通大学附属医院 发明人 倪松石;周晓宇;汤志远;黄剑飞;李军
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 南京瑞弘专利商标事务所(普通合伙) 32249 代理人 徐激波
主权项 一种筛选肺血栓栓塞症中潜在的分子标记物的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)构建白兔的PTE模型;2)肺组织及血液收集;3)形态学分析;光镜下,观察PTE组肺动脉内径狭窄程度和肺动脉内皮细胞改变情况,反映肺栓塞严重程度;4)RNA的提取及基因表达分析;从样本中提取总RNA,扩增并转录成荧光cRNA,带荧光的cRNA与包含有14,765个基因的兔基因组杂交;最后杂交的序列由Agilent Scanner G2505C扫描收集数据,共有8组样品进行数据分析;从而得到基因的聚类分析结果;5)差异性表达基因的功能分析;6)逆转录聚合酶链反应和免疫印迹分析验证,获得潜在的分子标记物。
地址 226000 江苏省南通市崇川区西寺路20号