蓝色4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染料示踪基因纳米载体的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种蓝色4’,6‑二脒基‑2‑苯基吲哚染料示踪基因纳米载体的制备方法；本发明的技术方案包括：介孔硅壳纳米颗粒表面连接分子量大小为600的低分子量聚醚酰亚胺(PEI)。蓝色4’,6‑二脒基‑2‑苯基吲哚染料染料的包埋:将DAPI染料包埋至介孔二氧化硅纳米的介孔中。制备的蓝色4’,6‑二脒基‑2‑苯基吲哚染料示踪基因纳米载体，直径为80～150纳米，孔径为0.5～2纳米，载药率为20～40％；具有较高的基因转染效率、较低的细胞毒性；可以通过观察纳米载体内DAPI染料的分布情况来实时跟踪基因所到达的位置。

主权项

一种蓝色4’,6‑二脒基‑2‑苯基吲哚染料示踪基因纳米载体的制备方法；其特征步骤如下：1)介孔二氧化硅纳米颗粒的羧基化：称取介孔二氧化硅纳米颗粒用无水吡啶配制成1～100毫克每毫升的溶液，加入质量比为1:3～1:30的丁二酸酐，在磁力搅拌条件下，搅拌反应6～12小时，得到羧基化的介孔二氧化硅纳米颗粒；2)介孔硅壳纳米颗粒表面连接聚醚酰亚胺：将羧基化的介孔二氧化硅纳米颗粒溶解于去离子水中；加入质量比为1:1～1:10，相对分子质量为600的聚醚酰亚胺，并在磁力搅拌条件下，搅拌反应6～12小时；待反应结束后，用去离子水洗涤沉淀1～3遍，得到可吸附DNA的基因纳米载体；3)将蓝色4’,6‑二脒基‑2‑苯基吲哚染料染料包埋至介孔二氧化硅基因纳米载体中并进行基因的细胞转染：将基因纳米载体配成1～10毫克每毫升的水溶液，然后加入与基因纳米载体的质量比为1:2～1:20的蓝色4’,6‑二脒基‑2‑苯基吲哚染料，在磁力搅拌条件下，搅拌反应6～12小时；待反应结束后，用去离子水洗涤沉淀1～3遍，得到实时跟踪外源基因的介孔二氧化硅基因纳米载体。