一种玉米醇溶蛋白生物改性的方法

摘要

本发明公开了一种玉米醇溶蛋白生物改性的方法，属于玉米醇溶蛋白领域。本发明从玉米中提取得到一定分子量范围的玉米醇溶蛋白，并使玉米醇溶蛋白表面形成密孔结构，将白腐真菌和褐腐真菌在马铃薯培养基上培养得曲悬浮液，最后将密孔结构的玉米醇溶蛋白溶于曲悬浮液中进行生物改性，改性后取出即可，本发明利用生物法破坏玉米醇溶蛋白中大量的二硫键，从根源上解决了玉米醇溶蛋白水溶性差的问题，而且工艺简单，环保无污染，不改变蛋白的活性，使玉米醇溶蛋白具有更广泛的应用。

主权项

一种玉米醇溶蛋白生物改性的方法，其特征在于具体改性步骤为：（1）取200～300g玉米，按固液比1:5加蒸馏水混合，用浓度为1mol/L氢氧化钠溶液调节pH为7.5～8.5，调节后加热升温至沸腾，保持沸腾状态30～60min，沸腾后冷却至50～70℃，再加入玉米质量5～7%碱性蛋白酶，酶解3～5h后在110～120℃下灭酶并离心分离，得上清液，向其中加入上清液质量1～3%糖化酶，在室温下酶解2～4h，酶解后灭酶，离心分离得上清液；（2）将上述上清液用超滤机处理，将超滤压力达到0.15～0.20MPa时停止超滤，截留分子量为30000～40000Da的分子，收集超滤滤过液，即可为玉米醇溶蛋白液，按体积比1:3将其加入无水乙醇溶液中，静置至沉淀完全析出，过滤得沉淀物，将沉淀物放入长方形的模型中，并放入烘箱中干燥，得玉米醇溶蛋白固体；（3）用直径为0.1～0.3mm的针对上述玉米醇溶蛋白固体处理，使其表面形成密度为4～6孔/cm²的密孔，得多孔型玉米醇溶蛋白固体，备用；（4）称取100～200g马铃薯切成小块，加500～800mL水煮制至沸腾30～40min，煮后过滤，向得到滤渣中加入8～10g葡萄糖、10～15g琼脂和500～700mL蒸馏水，搅拌均匀后在105～110℃下高温灭菌5～10min，得到马铃薯固体培养基；（5）依次接种2～5株白腐真菌和3～6株褐腐真菌于上述马铃薯固体培养基中，放入恒温培养箱，于30～35℃下培养2～3天，待其繁殖茂盛后用去离子水冲洗表面2～4次，得到种曲悬浮液；（6）将步骤（3）多孔型玉米醇溶蛋白固体浸泡在上述曲悬浮液中，浸泡10～12h，浸泡后取出，用清水清洗表面3～5次后放入烘箱中，在50～60℃下干燥5～6h，干燥后粉碎、过筛得80～100目粉末，即可。