一种用于糖尿病溃疡的活性凝胶海绵的制备方法

摘要

本发明涉及医疗用品制造领域，尤其是一种用于糖尿病溃疡的活性凝胶海绵的制备方法，解决了目前用于治疗糖尿病足溃疡的生物敷料疗效有效的技术问题，本技术方案包括活性层凝胶和保护层凝胶，活性层凝胶的制备；保护层凝胶的制备；将活性层凝胶和保护层凝胶复合并进行低温冷冻干燥，形成凝胶海绵，密封包装后灭菌制备完成。本发明制备的活性凝胶海绵具有普通敷料的创面保护特性，也具有强大的血管再生与组织修复能力，并且这种复合的生长因子与细胞外基质蛋白相较于单一的生长因子治疗而言更具有血管再生与创面修复能力，该活性敷料采用冻干的形式，更利于维持凝胶中大量生长因子以及活性蛋白的活性，并且能在室温条件下存放和运输。

主权项

一种用于糖尿病溃疡的活性凝胶海绵的制备方法，其特征是：它包括活性层凝胶和保护层凝胶，活性层凝胶的制备：（1）配制混合溶液I，溶液I的基础溶剂是去离子水，其中含有1%～5%质量体积比的海藻酸钠，0.1%～0.5%质量体积比的小分子胶原蛋白，0.1%～0.5%质量体积比的透明质酸，0.1%～0.5%质量体积比的硫酸软骨素，（2）将提前培养好的、成活率90%以上的脐带间充质干细胞充分混合进溶液I中，使得脐带间充质干细胞的终浓度达到1×10⁶～1×10⁷ 个细胞每毫升，配制成混合液II，（3）将混合液II倒入提前准备好的平皿中，（4）向平皿中加入2倍体积以上，浓度为1.5%的CaCl₂溶液，静置30～120分钟制成凝胶，吸出CaCl₂溶液，并用无菌生理盐水清洗凝胶三遍以上，（5）向平皿中加入至少3倍于凝胶体积的间充质干细胞培养液，无菌培养6～10天，每隔1～2天换液一次，（6）培养结束后，利用无菌生理盐水清洗培养结束的凝胶3～6遍，备用；保护层凝胶的制备：（1）配制混合溶液III，溶液III的基础溶剂是去离子水，其中含有1%～5%质量体积比的海藻酸钠，含1%～5%质量体积比的羧甲基壳聚糖,（2）将溶液III倒入提前准备好的平皿中，（3）向平皿中加入至少3倍溶液III体积以上的50～100 g/L金尼平溶液，静置交联10～60分钟，制成凝胶,（4）将提前准备的活性凝胶层放置在保护层凝胶的上方，加入等面积的1～5kg的重物压制10～60分钟，然后向平皿中加入3倍凝胶体积以上的5%的氯化钙溶液，静置10～30分钟，使得凝胶更加稳定，并且活性层与保护层会相互结合,（4）吸出氯化钙溶液，然后用无菌生理盐水清洗3～6遍；将活性层凝胶和保护层凝胶复合并进行低温冷冻干燥，形成凝胶海绵，密封包装后灭菌制备完成。