发明名称 |
一种汉逊酵母特异性表达载体的构建及在提高乙肝病毒表面抗原在汉逊酵母表达量的方法 |
摘要 |
本发明公开一种汉逊酵母特异性表达载体的构建及在提高乙肝病毒表面抗原在汉逊酵母表达量的方法,属于生物工程技术领域,构建:步骤1,从真核汉逊酵母菌株ATCC34438或其衍生菌种基因组DNA,设计特异性引物,PCR扩增,分别调取MOX基因启动子MOXp和终止子MOX‑TT;步骤2,将毕赤酵母表达载体pPICZC上的启动子AOX1和终止子AOX‑TT,分别替换成MOX基因启动子MOXp和终止子MOX‑TT,即得汉逊酵母表达载体pHPZF1.0。采用本发明所述方法,可以获得的乙型肝炎表面抗原汉逊酵母酵母工程菌株能够以甲醇诱导型方式稳定和高效地表达HBsAg重组蛋白,适用于规模化生产HBsAg重组蛋白。 |
申请公布号 |
CN105755035A |
申请公布日期 |
2016.07.13 |
申请号 |
CN201610137206.8 |
申请日期 |
2016.03.11 |
申请人 |
安徽智飞龙科马生物制药有限公司 |
发明人 |
黄恩启;吴常伟;李超;王力卫;刘术敏;程英杰;陶立峰;杨世龙 |
分类号 |
C12N15/81(2006.01)I;C12N15/51(2006.01)I;C12R1/78(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/81(2006.01)I |
代理机构 |
合肥天明专利事务所 34115 |
代理人 |
孙永刚 |
主权项 |
一种汉逊酵母特异性表达载体pHPZF1.0的构建方法,其特征在于,按照下述步骤进行构建:步骤1,提取真核汉逊酵母菌株ATCC34438或其衍生菌种基因组DNA,设计特异性引物, PCR扩增,分别调取MOX基因启动子MOX‑P和终止子MOX‑TT;步骤2,将毕赤酵母表达载体pPICZC上的启动子AOX1和终止子AOX‑TT,分别替换成MOX基因启动子MOX‑P和终止子MOX‑TT,即得汉逊酵母表达载体pHPZF1.0。 |
地址 |
230088 安徽省合肥市高新区浮山路100号 |