主权项 |
多肉植物巨大赤线HO1的组织培养法,其特征在于包括以下步骤:1)、取生长健壮且无病虫害的巨大赤线HO1花梗,流水冲洗;2)、愈伤组织的诱导:将上述流水冲洗后的花梗经消毒后,切割成长度为3~5mm,横放接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养;培养条件为:16小时光照,光照强度30~40μmol m<sup>‑2</sup>·s<sup>‑1</sup>,温度为25±1℃;8小时暗培养,温度为21±1℃;上述光照和暗培养交替进行;3)、不定芽诱导:待无菌愈伤组织成簇状生长时,分割成0.5~1cm的小块;将小块愈伤组织接种到诱导不定芽培养基上进行培养;培养条件为:16小时光照,光照强度30~40μmol m<sup>‑2</sup>·s<sup>‑1</sup>,温度为25±1℃;8小时暗培养,温度为21±1℃;上述光照和暗培养交替进行;4)、叶片诱导不定芽培养:待上述愈伤组织诱导的无菌苗长至直径0.6~1.5cm时,割取单株小苗Ⅰ的叶片;将此叶片沿着叶脉竖切成2半之后接种到增殖培养基中,从而使叶片顶端接触增殖培养基;培养条件为:16小时光照,光照强度40~50μmol m<sup>‑2</sup>·s<sup>‑1</sup>,温度为22~26℃;8小时暗培养,温度为20~22℃;上述光照和暗培养交替进行;5)、生根培养:待上述叶片诱导出的不定芽长到直径2~5mm,割取后作为小苗Ⅱ接种到生根培养基上进行生根培养;培养条件为:16小时光照,光照强度40~50μmol m<sup>‑2</sup>·s<sup>‑1</sup>,温度为22~26℃;8小时暗培养,温度为20~22℃;上述光照和暗培养交替进行;6)、壮苗培养:待上述小苗Ⅱ生根后,接种到壮苗培养基上进行壮苗培养,培养条件为:16小时光照,光照强度40~50μmol m<sup>‑2</sup>·s<sup>‑1</sup>,温度为22~26℃;8小时暗培养,温度为20~22℃;上述光照和暗培养交替进行。7)、移栽:待壮苗培养所得的小苗Ⅲ长至直径≥1.5cm、且长出长度大于2cm的根至少3条时,可出瓶种植。 |