发明名称 一种HPV18 E6单克隆抗体及其制备方法和应用
摘要 本发明公开了一种HPV18 E6单克隆抗体及其制备方法和应用,本发明利用生物信息学人工选择优势抗原表位肽,该多肽与BSA偶联后免疫原性良好,用该多肽制备的抗体效价高达10<sup>6</sup>,本发明还对HPV18E6蛋白进行了原核表达,Westernbolt结果表明本发明制备的HPV18E6多肽抗体可与HPV18 E6蛋白特异性结合,可用于Westernbolt检测,应用价值较高。本发明成功预测了HPV18 E6的多肽抗原表位,获得了理想的多肽片段,同时制备了相应的单克隆抗体,该抗体可以特异性识别HPV18E6抗原,为研究该蛋白的研究以及HPV18检测方法的建立奠定了基础,促进了HPV18相关疾病的诊断和治疗。
申请公布号 CN105753980A 申请公布日期 2016.07.13
申请号 CN201610189197.7 申请日期 2016.03.29
申请人 上海市普陀区中心医院 发明人 康向东;吴蓉;孔倩倩;相芬芬;詹月萍;许建;蒋洁敏;乐红红;郝文斌
分类号 C07K16/08(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;G01N33/577(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I 主分类号 C07K16/08(2006.01)I
代理机构 上海申新律师事务所 31272 代理人 竺路玲
主权项 一种HPV18 E6单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤,步骤一,合成序列如SEQ NO.1的HPV18 E6特异性多肽,并与蛋白载体偶联获得蛋白载体偶联的HPV18E6特异性多肽;步骤二,免疫,采用的抗原为所述步骤一中得到的蛋白载体偶联的HPV18 E6特异性多肽;步骤三,细胞融合,得到杂交瘤细胞;步骤四,对所述步骤三得到的杂交瘤细胞进行阳性克隆的筛选,得到特异性HPV18 E6单克隆抗体杂交瘤细胞;步骤五,利用步骤四所得的特异性HPV18 E6单克隆抗体杂交瘤细胞制得HPV18 E6单克隆抗体。
地址 200333 上海市普陀区兰溪路164号