皮肤色素沉着体外细胞模型及其制作方法

摘要

本发明涉及色素沉着模型及其制作方法技术领域，是一种皮肤色素沉着体外细胞模型及其制作方法，该皮肤色素沉着体外细胞模型，按下述步骤得到：第一步，将外科手术环切得到的幼儿新鲜包皮采用含有青霉素和链霉素的磷酸盐缓冲液进行清洗。本发明首次采用人皮肤黑色素细胞构建本发明所述的皮肤色素沉着体外细胞模型，使本发明所述的皮肤色素沉着体外细胞模型相对于现有皮肤色素沉着细胞模型而言，更加接近患有色素增加性等疾病的人皮肤，更加真实的模拟皮肤色素沉着后人皮肤的生理状况，为治疗色素增加性疾病的药物或改善皮肤色素沉着的化妆品制剂以及色素代谢障碍性疾病的筛选及评价研究提供了更加真实的参考依据。

主权项

一种皮肤色素沉着体外细胞模型，其特征在于按下述步骤得到：第一步，将外科手术环切得到的幼儿新鲜包皮采用含有青霉素和链霉素的磷酸盐缓冲液进行清洗，然后将清洗后的幼儿新鲜包皮在无菌的条件下去除皮下脂肪和结缔组织，接着将去除皮下脂肪和结缔组织的幼儿新鲜包皮采用裂解酶分离表皮层和真皮层后得到混悬液，采用吸头反复吹打混悬液，再将血清加入混悬液中，经过终止消化后得到表皮组织混悬液；第二步，将表皮组织混悬液依序经过过滤和离心后得到人皮肤黑色素细胞；第三步，将人皮肤黑色素细胞依序经过UVB辐射和48小时至72小时的细胞培养后得到皮肤色素沉着体外细胞模型，其中，在UVB辐射过程中，照射强度为0.1 J/cm²至0.4 J/cm²，照射的次数为2次至3次，照射的时间间隔为12小时至24小时。