发明名称 FISH制片再次杂交的方法
摘要 本发明属于分子细胞遗传学领域,具体涉及一种FISH制片再次杂交的方法。该方法主要包括以下步骤:制片在首次荧光原位杂交后,浸泡于2×SSC中以洗掉盖片,然后在2×SSC中浸泡3×5min;随后把制片放入90℃的2×SSC中10min,期间不断摇动;再放入78℃的70%去离子甲酰胺中4min,期间不断摇动;随后迅速放入-20℃的70%酒精中。该过程可把杂交信号洗脱掉,随后观测制片,检测不到杂交信号。处理后的制片再次用相同的探针进行荧光原位杂交实验,在染色体的相同位置可再次检测到杂交信号。本发明所述的方法使得原位杂交后的制片可重复多次使用,有效得节约了资源,降低了成本,减少了对环境的污染。
申请公布号 CN104313138B 申请公布日期 2016.07.06
申请号 CN201410534116.3 申请日期 2014.10.11
申请人 中国农业科学院棉花研究所 发明人 崔兴雷;刘玉玲;刘方;王星星;蔡小彦;彭仁海;周忠丽;王春英;王玉红;王坤波
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 代理人 高宇
主权项 FISH制片再次杂交的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1)荧光原位杂交后的制片,在2×SSC浸泡下洗掉盖片,然后2×SSC浸泡制片3×5min,以洗掉盖片及制片上残留的试剂;2)随后把制片放入90℃的2×SSC下10min,期间不断摇动,把制片上的试剂彻底洗涤干净,初步变性制片上的染色体;3)再放入78℃的70%去离子甲酰胺中4min,期间不断摇动。
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