发明名称 |
一种阿胶中驴、猪源性巢式荧光PCR检测引物、探针组合物、试剂盒及检测方法与应用 |
摘要 |
本发明提供一种阿胶中驴、猪源性巢式荧光PCR检测引物、探针组合物、试剂盒及检测方法与应用,涉及分子生物学技术领域,利用本发明的引物、探针组合物以及多重巢式荧光PCR检测试剂盒可以快速鉴定出阿胶中驴、猪源成分。本发明针对阿胶中微量DNA或降解DNA,通过巢式PCR及小片段扩增技术,大大提高了引物及探针有效识别靶点的几率,因此大大提高检测准确性和灵敏度;两步PCR扩增在同一体系进行,具有闭管操作、污染率低、检测灵敏度高、特异性好、准确度高、通量大等有益效果。 |
申请公布号 |
CN105734156A |
申请公布日期 |
2016.07.06 |
申请号 |
CN201610273963.8 |
申请日期 |
2016.04.28 |
申请人 |
山东省农业科学院生物技术研究中心 |
发明人 |
步迅;张全芳;刘艳艳;范阳阳 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
北京中济纬天专利代理有限公司 11429 |
代理人 |
张祥明 |
主权项 |
一种同时鉴别阿胶中驴、猪源性成分的多重巢式荧光PCR检测引物、探针组合物,其特征在于,包括:(1)多重巢式荧光PCR检测驴、猪源性通用外侧引物,其核苷酸序列如下:正向引物序列:5'CCTGTATCAACACATAGAAGCAATA 3',如SEQ NO.1所示;反向引物序列:5'TCCTTTTACTTCTTTTAATCTTTCC 3',如SEQ NO.2所示;(2)多重巢式荧光PCR检测驴、猪源性通用内侧引物,其核苷酸序列如下:正向引物序列:5'TATGAGTAACAAGAATTATTTCTCC 3',如SEQ NO.3所示;反向引物序列:5'AGCCTGTGTTGGGTTAACAA 3',如SEQ NO.4所示;(3)驴特异性探针,其核苷酸序列如下:5'CAACAAAATAGACACAACCCAAAAACT 3',如SEQ NO.5所示;(4)猪特异性探针,其核苷酸序列如下:5'CTCCTCGCACACGCTTACATCAGTA 3',如SEQ NO.6所示;其中,所述驴、猪特异性探针的5’端修饰有报告基团,3’端修饰有淬灭基团,所述报告基团为FAM、HEX、TAMRA、ROX、CY5中的任一种,所述淬灭基团为Dabcyl、BHQ1、BHQ2中的任一种。 |
地址 |
250100 山东省济南市历城区工业北路202号 |