一种泛一、二甲基化抗体及其制备方法

摘要

本发明属于生物医药技术领域，具体为一种泛一二甲基化抗体及其制备方法。本发明直接用多肽偶联载体蛋白，如牛血清白蛋白或卵清蛋白或血蓝蛋白或牛甲状腺球蛋白作为免疫抗原前提底物，用烷基化试剂(2-氯乙基)-甲基氯化铵和(2-氯乙基)-二甲基氯化铵通过化学修饰把载体蛋白中的半胱氨酸进行烷基化修饰分别模拟成一甲基化修饰赖氨酸(Kc[me1])和二甲基化修饰赖氨酸(Kc[me2])；再以Kc[me1]和Kc[me2]的混合物作为免疫抗原，免疫兔子，得到特异性识别一二甲基化蛋白抗体。用泛一二甲基化抗体与多个组蛋白甲基化修饰的多肽进行免疫沉淀实验并进行蛋白质印迹检测，结果显示，得到的泛一二甲基化抗体可以特异识别一二甲基化修饰的组蛋白多肽而几乎不识别零甲基化，或者三甲基化修饰的组蛋白多肽。

主权项

一种泛一、二甲基化抗体的制备方法，其特征在于具体步骤为：（1）直接用多肽偶联载体蛋白：牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或牛甲状腺球蛋白，作为免疫抗原前提底物，用烷基化试剂(2‑氯乙基)‑甲基氯化铵和(2‑氯乙基)‑二甲基氯化铵通过化学修饰把载体蛋白中的半胱氨酸进行烷基化修饰分别模拟成一甲基化修饰赖氨酸(记为Kc[me1])和二甲基化修饰赖氨酸记为(Kc[me2])；（2）再以这个富含模拟的一甲基化修饰赖氨酸的载体蛋白(Kc[me1])和二甲基化修饰赖氨酸的载体蛋白(Kc[me2])混合物作为免疫抗原底物，免疫兔子，得到特异识别一二甲基化蛋白抗体。