从血液中分离循环肿瘤细胞的方法

摘要

本发明公开了一种从血液中分离循环肿瘤细胞的方法，该方法包括如下步骤：A、将血液样品与能够特异性结合循环肿瘤细胞表面独特抗原的抗体-标记单链多核苷酸复合物混合并孵育；B、将孵育后的血液样品流经微流控芯片，芯片的微通道内至少有一个表面负载有单链多核苷酸，通过多核苷酸与抗体-标记单链多核苷酸复合物中的标记单链多核苷酸的特异性结合将循环肿瘤细胞从血液中分离出来并固定在芯片表面，以实现循环肿瘤细胞与血液样品的分离。本发明中的芯片的微通道具有特殊的几何结构，能够增加血液中细胞与微通道表面接触的几率，从而提高循环肿瘤细胞的捕获效率，且芯片无需进行抗体负载，整个捕获过程操作简便，同时芯片也易于长期保存。

主权项

一种从血液中分离循环肿瘤细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：A、将经抗凝处理的血液样品与能够特异性结合循环肿瘤细胞表面独特抗原的抗体‑标记单链多核苷酸复合物混合并孵育；B、将孵育后的血液样品流经微流控芯片，芯片的微通道内至少有一个表面负载有单链多核苷酸，该单链多核苷酸能够与抗体‑标记单链多核苷酸复合物中的标记单链多核苷酸特异性结合，并通过这种特异性结合将循环肿瘤细胞从血液中分离出来并固定在芯片表面以实现循环肿瘤细胞与血液样品的分离；其中，所述抗体‑标记单链多核苷酸复合物中的标记单链多核苷酸与负载于芯片微通道表面的单链多核苷酸能够特异性结合并形成稳定的双链结构，两种单链多核苷酸中至少有连续的10个核苷酸互补；并且，所述微流控芯片具有使流经该芯片的细胞增加与负载有单链多核苷酸表面接触几率的几何结构，该几何结构包括周期性的微柱阵列结构、具有周期性表面凹凸的“鱼骨型”结构或表面沉积有纳米线、纳米带的基底；所述的负载于芯片的微通道内至少有一个表面的单链多核苷酸是序列如SEQ ID NO.:1所示的多核苷酸：AAAAAAAAAAGTCGAGGATTCTGAACCTGT；并且所述的抗体‑标记单链多核苷酸复合物中的单链多核苷酸的序列如SEQ ID NO.:2所示：NH₂－AAAAAAAAAAACAGGTTCAGAATCCTCGAC。