一种用于microRNA靶向传递的纳米载体复合物及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种用于microRNA靶向传递的纳米载体复合物及其制备方法与应用。所述载体复合物为由鱼精蛋白硫酸盐、透明质酸和目的microRNA组成纳米复合体系，其中目的microRNA为具有癌症抑制功能微小RNA类似物（microRNA mimics）。带正电荷的鱼精蛋白硫酸盐能通过静电作用与带负电荷的透明质酸自组装形成纳米载体，形成过程中包裹microRNA，给予microRNA有效的保护，避免microRNA被RNA酶降解。本发明以透明质酸和鱼精蛋白作为microRNA载体，材料来源广、价格低，同时制备过程简单，温和；同时纳米载体中的组成成分透明质酸，具有主动靶向肿瘤的能力，在microRNA治疗癌症方面具有良好的应用前景。

主权项

一种用于microRNA靶向传递的纳米载体复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将透明质酸加入到无RNA酶的水中，使透明质酸质量浓度为2mg/mL；透明质酸分子量为23万；(2)将鱼精蛋白硫酸盐加入到无RNA酶的水中，使鱼精蛋白硫酸盐溶液质量浓度为1mg/mL；(3)将microRNA溶解于无RNA酶的水中，配制成20μg/mL浓度的microRNA溶液；(4)将1mL步骤(3)中的microRNA溶液与1mL步骤(1)中的透明质酸溶液混合，涡旋震荡均匀，得混合液；(5)将1mL步骤(2)中的鱼精蛋白硫酸盐溶液，滴加到步骤(4)中得到的混合液中，并且涡旋震荡均匀，孵育20‑30分钟；所用的microRNA是在乳腺癌中低表达的miR‑34a，MiR‑34a:Sense:UUCUCCGAACGUGUCACGUdTdTAntisense:ACGUGACACGUUCGGAGAAdTdT。