七重PCR快速筛查检测商业化应用转基因油菜的引物及检测方法

摘要

本发明公开了一种快速筛查检测商业化应用的转基因油菜外源基因至少两次的多重PCR检测方法，所述引物具有较强的特异性，能够用于多重PCR筛查检测分析。所述检测方法提供了一种检测快速、操作简便、扩增性能好、灵敏度高的转基因筛查检测方法，实现了转基因油菜多个外源基因同步检测。利用毛细管电泳对PCR扩增产物进行分析，其片段大小区分率可达数个碱基，分辨率高。本发明的引物和检测方法为转基因植物提供了一种快速、有效、可靠的高通量筛查检测方法。本发明建立的多重PCR反应体系不仅可以检测转基因油菜外源基因，而且还能扩增到其他转基因植物的筛查检测。

主权项

七重PCR快速筛查检测商业化应用转基因油菜的引物，其特征在于，包括以下引物序列：pat‑F：5'‑CGCGGTTTGTGATATCGTTAAC‑3'；pat‑R：5'‑TCTTGCAACCTCTCTAGATCATCAA‑3'；CruA‑F：5'‑GGCCAGGGCTTCCGTGAT‑3'；CruA‑R：5'‑CTGGTGGCTGGCTAAATCGA‑3'；P‑FMV 35S‑F：5'‑CAGCATTCCAGATTGGGTTCA‑3'；P‑FMV 35S‑R：5'‑CTTTTGGCTAATGGTTTGGAGAC‑3'；T‑NOS‑F：5'‑GAATCCTGTTGCCGGTCTTG‑3'；T‑NOS‑R：5'‑TTATCCTAGTTTGCGCGCTA‑3'；P‑CaMV 35S‑F：5'‑GCTCCTACAAATGCCATCATTGC‑3'；P‑CaMV 35S‑R：5'‑GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCC‑3'；CP4‑EPSPS‑F：5'‑GACTTGCGTGTTCEGGCTT‑3'；CP4‑EPSPS‑R：5'‑AACACCGTTGAGCTTGAGA‑3'；bar‑F: 5'‑GAAGGCACGCAACGCCTACGA‑3'；bar‑R: 5'‑CCAGAAACCCACGTCATGCCA‑3'。